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消除运动性疲劳的方法
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　　摘 要： 运动性疲劳的及时消除是每一名教练员（运动员）都必须重视的问题，运动性疲劳消除后，不但使运动员身体各项生理指标恢复到原水平或超过原水平，而且可以达到预防运动损伤、提高运动成绩的目的。在正确诊断运动性疲劳程度的前提下，可以通过制定良好的生活制度、科学的训练计划、合理的膳食结构并运用医学手段来有效消除运动性疲劳。 中国论文网 /9/view-909340.htm　　关键词： 运动性疲劳 合理营养 物理疗法 心理疗法 　　 　　1.判断疲劳程度是消除运动性疲劳的前提条件 　　在运动训练中，一般是教练员首先通过观察运动者的运动征象和自我感觉，再参照运动性疲劳程度标志表（见下表），对运动员的疲劳程度作出判断。 　　2.运动性疲劳的消除方法 　　2.1训练的方法、手段要科学，这是消除运动性疲劳的重要环节。 　　2.1.1科学、合量地安排运动员训练的周期及负荷的量与强度，运用各种科学合理的训练方法与手段，最大限度地避免运动性疲劳的出现与发生。 　　2.1.2积极性休息。积极性休息对紧张训练和比赛引起的肌肉和精神的疲劳有着良好的缓解作用，教练员可根据周边条件和运动员的不同爱好，有选择地安排适当的活动内容实现运动员的自我调节。 　　2.1.3保障睡眠质量。运动员应严格遵守作息制度，并创造良好的睡眠环境，每天就寝前应尽量使心态趋于平稳，避免外界刺激，且保持室内空气新鲜，每天保证不少于8―9小时的睡眠时间，在大运动负荷训练后和比赛期间，睡眠时间还可适当延长。 　　2.2剧烈运动后进行整理放松是消除疲劳的一种积极手段。 　　2.2.1生理放松 　　在体育比赛和训练之后，应安排运动员做适当内容的整理放松，如在剧烈赛跑后，逐渐转为慢跑和走，同时做深呼吸，腿部屈伸，自我按摩或他人按摩；负重练习后，可安排轻跳，慢跑等练习内容；训练结束后还可以通过做拉伸练习、自编舞蹈和趣味游戏来达到放松身体各部肌肉的目的。 　　2.2.2心理放松 　　心理恢复主要是通过意念活动进行放松，它是按一定的套语暗示进行自我引导，使肌肉放松，心理平静，从而调节自主神经系统的机能，加快身体尽快恢复。 　　2.3合理营养是消除疲劳或提高抗疲劳能力的重要方法。 　　不同专项的运动项目需要不同营养： 　　速度性的运动项目：膳食中应含较多易吸收的碳水化合物，维生素B1和维生素C，为满足神经和肌肉代谢的需要，还应供给蛋白质丰富的食物和磷，为使体内碱储备充足，宜多吃蔬菜、水果等碱性食物。 　　耐力性运动项目：能量补充要多供给糖以增加糖原的储备，同时还要增加维生素B1、维生素C和磷，超长距离项目，中途还需少量多次饮用水及运动饮料。 　　力量性运动项目：要供给充足的蛋白质和维生素B2，维持神经肌肉正常功能的钠、钾、钙和镁也要及时补充，同时，对碳水化合物、铁、维生素B1和维生素C的需要量较多。 　　柔韧灵敏性运动项目：热能消耗不大，但要求机体协调性高，神经系统较紧张，为保证神经系统的机能，需要较多维生素B1、维生素C和磷，膳食中不宜摄入较多的脂肪，以免影响体重和体脂。 　　2.4利用理疗手段、中药和吸入法是消除疲劳的重要方法。 　　2.4.1运用各种理疗手段，可以促进血液循环，加速疲劳的消除及机能的恢复。按摩是促进恢复的有效途径之一，应根据运动项目的特点和疲劳情况进行，身体负担量较大的部位，应是按摩的重点部位，按摩时，对肌肉部位应以揉捏为主，交替使用按压、抖动、扣打等手法，在肌肉发达的部位，如按摩者手的力量不足，可用肘顶、脚踩、脚搓等手法，关节部位应以擦摩为主，穿插使用按压、搓和运拉，要求在按摩时一定要由轻到重让关节逐步适应，否则会出现损伤，按摩开始和结束时用推摩和擦摩的手法，按摩一般在训练、比赛之后，当身体还处在发热状态下进行按摩。在条件允许的情况下，也可进行温水浴，它不但可以加快身体血液循环，放松肌肉，还以可起到加快清除体内代谢废物，改善神经肌肉的营养的作用，从而促进运动员的机体得以尽快恢复，温水浴可分盆浴和淋浴，水温一般在40摄氏度左右，每次一般在15―20分钟，不宜过长。运动员还可通过热敷消除运动性疲劳，它能减少肌肉中酸性代谢物的堆积，消除肌肉僵硬紧张和酸痛，进行热敷时的温度控制应以47―48摄氏度为宜。 　　2.4.2运用中药疗法。黄芪、刺五加、参三七，这些中药都具有调节中枢神经系统的功能，起到扩大冠状动脉和补气壮筋的作用，对消除疲劳有较好的效果。运动员服用麦芽油和花粉，也有抗疲劳、增体力的功效。在运用中药治疗时必须根据运动员的身体状况，疲劳程度，在医务人员监督下进行。 　　3.结论与建议 　　运动性疲劳是一种生理现象，对人体来说又是一种保护性机制，一旦运动员长期处于疲劳状态，就容易导致过度疲劳，从而影响身体健康和运动能力。所以，在运动训练中，我们一方面要加强医务监督，及时了解运动员的身体状况，制订科学合理的训练计划，另一方面在运动训练结束后一定要采取有针对性的恢复措施，及时消除运动员的疲劳，使他们的体力得到较快的恢复，继而实现运动员运动水平及运动成绩的不断提高。 　　 　　参考文献： 　　［1］体育保健学教材编写组编.体育保健学.北京：高等教育出版社，2000，第2版. 　　［2］王维群主编.营养学.北京：高等教育出版社，2001. 　　［3］中国学校体育.北京中国学校体育杂志社，1999，（6）. 　　注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
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肌肉疲劳的成因及恢复
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浅析运动性疲劳与疲劳恢复的手段
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　　 前言 中国论文网 /5/view-1895928.htm　　 运动员在进行一段时间的大强度训练和激烈的比赛之后,往往出现疲劳,达不到原有的竞技水平,这就是运动性疲劳，它作为一种生理现象，如影随形的陪伴着运动实践，不仅造成运动员的机能能力下降，导致运动员技术动作扭曲变形，还会产生运动损伤与运动性疾病等诸多消极不利的后果，所以运动性疲劳成为了一个困扰多年的重要课题。因此，了解运动性疲劳的发生机制，掌握合理有效的防治措施从而消除疲劳对提高运动成绩、增进健康有着十分重要的理论价值和实践意义。这也是近年来，广大体育工作者一直致力研究的方向。 　　 一、运动性疲劳的定义 　　 运动性疲劳是指运动引起的肌肉最大收缩或者最大输出功率暂时性下降的生理现象。肌肉运动能力下降是运动性疲劳的基本标志和本质特性。 　　 疲劳概念的研究与人类探索疲劳的研究是同时起步的，它一开始就成为疲劳问题研究的热点。1880年，莫桑（Mosso）就开始了对人类疲劳的研究，在1915年他就提出了：疲劳是细胞内化学变化衍生物导致的一种中毒现象； 1980年，Karlsson提出，疲劳是丧失保持所需或预想的输出功率。经过近100年的历史，直至1982年的第5届国际运动生物化学会议上，运动性疲劳定义为：“机体的生理过程不能持续其机能在一特定水平或不能维持预定的运动强度。”近些年来，对运动性疲劳概念的提法已较为明确，这些提法的共同点，即生理性疲劳是由于工作或活动本身引起的，已区别于诸如疾病、环境、营养等原因所致。我国学者，把“人体运动到一定时候，运动能力及身体功能暂时下降的现象”叫做运动性疲劳。 　　 二、运动性疲劳的产生机理与产生部位 　　 （一）运动性疲劳的产生机理 　　 1.“衰竭学说” 　　 这一理论认为疲劳的产生是由于在某一大强度运动中，起主要供能作用的能源物质大量消耗所致。例如百米跑运动，由于运动强度极大，运动中消耗的能量主要来自磷酸肌酸的分解供能，当跑至60-80米处，无论是一般运动员还是世界优秀运动员都会出现跑速降低的现象，即出现了运动性疲劳。究其原因是体内储存的高速率供能物质――磷酸肌酸被大量消耗，人体运动中需要的能量不得不依靠糖的无氧酵解，由于糖本酵解供能的速度约为磷酸肌酸的二分之一，所以跑的速度出现了下降。 　　 2.“堵塞学说” 　　 这一理论认为疲劳的产生是由于大强度的运动中某些代谢产物在肌肉中大量堆积所致。例如在800米跑的运动员中，能量供应的主要途径是糖的无氧本酵解。运动中产生的乳酸可以通过以下六个方面影响运动能力。①阻碍兴奋在神经肌肉接点处的传递。②抑制磷酸果糖激酶减慢糖酵解过程。③H+可代替肌钙蛋白中的钙，降低肌肉的收缩能力。④H+作用于脑，引起疼痛、恶心、定向障碍等严重副作用。⑤抑制脂肪组织内敏感脂肪酶的活性，限制自由脂肪酸进入血液。 　　 3.“内环境稳定性失调学说” 　　 这一理论认为疲劳的产生是由于大强度的运动中PH值下降，水盐代谢紊乱和血浆渗透压改变等因素所致。例如在高温下运动员进行大运动量活动，致使不能继续运动时，给予饮水仍不能缓解，但饮用含0.04-0.14％的NaCl水溶液对疲劳就有所克服。 　　 4.“保护性抑制学说” 　　 根据巴浦洛夫学派的观点运动性疲劳是由于大脑皮质产生了保护性抑制。运动时各种内外感觉器接受的大量信息传至大脑皮质相应的神经细胞，使其长时间兴奋导致能量消耗过多，当消耗达到一定程度时即产生抑制，这对大脑皮层具有保护作用。在长时间的运动中这可能是导致疲劳的重要因素。 　　 5. “突变理论” 　　 这一理论认为疲劳的产生可能是由于大强度的运动中，能量供应不能以足够的速率满足运动的需要，或是肌肉力量下降，也可能是兴奋-收缩偶联功能发生障碍而导致发生疲劳，这些因素之间的变化不呈线性关系。在肌肉疲劳的发展过程中，存在不同途径的逐渐衰减突变过程，形如一条链的断裂现象。 　　 6.“自由基损伤学说” 　　 研究发现，在众多自由基中，氧自由基与运动的关系最为密切。运动时氧自由基的增加是导致运动性疲劳发生的一个重要因素。多不饱和脂肪酸是易受氧自由基进攻的靶物质。而在细胞的膜系统中就含有丰富的多不饱和脂肪酸。因而当生物体内氧自由基的含量增加时，氧自由基就会与生物膜中的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应，从而导致肌肉的工作能力下降。 　　 （二）运动性疲劳的产生部位 　　 人体任何形式的疲劳总是发生在集体的某些活某几个部位。一般来说，较易发生疲劳的部位是神经中枢，运动结板肌肉等处，按发生部位的不同，可分为中枢疲劳，神经-肌肉节点疲劳和外周疲劳。中枢疲劳是在运动性疲劳的发展过程中，中枢神经系统起着主导作用，疲劳的产生是中枢神经的一种维护性抑制，以防止集体发生过度的机能衰竭；神经-肌肉接点疲劳也叫运动中枢疲劳，是神经和肌肉之间连接并传递神经冲动引起肌肉收缩的部位，也是引起疲劳的重要部位；外周疲劳包括除神经系统和运动结板之外各器官在疲劳时的变化，肌肉是主要的运动组织，运动时肌肉能源物质代谢，调节，肌肉的温度，局部肌肉血液，肌肉等成为外周疲劳的研究重点和表现形式。 　　 三、运动性疲劳的常用恢复方法 　　 （一）消除骨骼肌疲劳的常用方法 　　 消除骨骼肌疲劳主要采用物理疗法，常见的有以下几种： 　　 （1）沐浴疗法。沐浴是消除肌肉疲劳的一种最简单的方法。它可以刺激血管扩张，促进血液循环和新陈代谢，加速代谢产物的排出，改善神经肌肉的营养。当然，水的温度，每个人适应能力不同，入浴时间过长，次数过频，水的温度过高，也会消耗能量而造成疲劳。因此，要根据自己的具体情况，进行适应控制。 　　 （2）针灸和拔罐法。针灸是针法和灸法的合称。治疗疲劳的针法可以局部取阿是穴，也可以循经取强壮穴。治疗疲劳的灸法多用艾灸，一般取强壮穴。拔罐法是以杯罐作工具，吸附于身体一定部位，使之产生瘀血现象。 　　 （3）沌氧疗法。激烈紧张的肌肉活动是以氧化不完全为特点的，大强度负荷运动后，给氧是必要也是必须的。常用的有高压氧、常压氧、氧舱、小氧瓶等。 　　 （二）消除神经系统疲劳的常用方法 　　 （1）按摩。按摩主要是消除肌肉僵硬和局部疲劳，促使静脉血液回流，减轻心脏负担，消除血乳酸，加速机体恢复。在大运动量训练后进行自我按摩或运动员之间的互相按摩对消除疲劳和恢复体力是非常有益的。按摩时应注意：①局部按摩和整体按摩相结合，先全身，后局部。消除疲劳的全身性按摩，一般采取俯卧位。其方法可以从颈后向下开始顺着血管和淋巴回流方向进行，手法必须缓慢而柔和。如某部位需要重点按摩时，应在全身按摩结束之后再进行。②根据不同的人、不同的疲劳程度与部位，采用不同的按摩手法，因症施治。对于极度疲劳者，按摩时其手法应以“轻补”为主，节奏不宜太快，以轻揉缓捏、平推轻揉为主；③关节是按摩的重点，应认真全面进行。关节结构复杂，对其按摩的技巧要求较高，手法应以揉为主，先轻推几次，后用揉捏与重推交替进行，有时可以按压，最后以轻推运拉结束。④先按摩大肌肉群，后按摩小肌肉群。其手法以揉捏为主。
　　 （2）心理恢复。心理恢复主要是意念活动。运动后要排除思想杂念，将注意力集中在调节呼吸上，用意念使自己的呼吸放慢、拉长，来排除所受到的内外不良的刺激，可使过分疲劳、紧张和紊乱状态，得到适当的调节。 　　 （三）消除心血管系统疲劳的常用方法 　　 （1）整理运动与休息。动后的整理活动能加速代谢产物的清除，是消除疲劳、加快体力恢复的重要手段，因而整理活动的强度、内容及顺序都要有科学的安排。整理活动的目的是使身体更好地由紧张的运动状态逐渐过渡到相对的静止状态。如果剧烈运动后骤然停止，身体的静止姿势会妨碍强烈的呼吸动作，影响氧的补充和静脉血的回流，使心脏血液的输出量减少，血压降低，造成暂时脑贫血，从而产生恶心、呕吐、面色苍白、心慌、甚至晕倒等现象，对机能的恢复、疲劳的消除和肌肉酸痛的消除都不利。因此，在运动后应做适当的整理活动。做整理活动时，量不宜大，动作尽量缓慢、放松，使身体逐渐恢复到安静状态。如剧烈运动之后，可进行放松慢跑、走或做放松操，同时进行深呼吸，也可随音乐进行放松跳动等。 　　 （2）物理疗法。包括按摩、温水浴、热水浴、桑拿浴、理疗、吸氧、负离子等。 　　 （3）合理安排膳食。在现代竞技运动中,运动员承受的运动负荷达到了相当高的程度，以致训练和比赛后往往体力、精神消耗极大，疲劳不堪，如不及时补充营养，恢复体力，则将影响后续训练和比赛。因此，运动后的营养恢复是运动训练后消除疲劳不可忽视的一项内容，经研究证实，膳食中蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质的配比失调，对运动能力及身体恢复有极大的影响。因此，我们应该科学地利用营养因素来补充因运动而消耗物质，修复损伤的体内机构，帮助消除机体的疲劳，促进运动成绩的提高。 　　 四、结论 　　 1.运动性疲劳是训练时必然会发生的复杂的生理过程，它不仅影响着技术的发挥与成绩的提高还将对机体的健康带来严重的负面影响，因此只有将消除疲劳与相应的运动训练有机的结合起来，才能应对运动性疲劳。 　　 2.运动性疲劳的消除方法很多，但是要秉持着以下几点：（1）消除方法的针对性要强。由于处在运动性疲劳状态中的人，一方面，本身有不同的特点，如健康状态、技能水平等；另一方面，人事不同的运动项目而产生的疲劳又各不相同。因此，要对具体问题进行具体分析，找出有针对性的消除措施，方能快速有效地消除疲劳。（2）消除方法的综合性运用。由于运动性疲劳的生养往往不以单一的形式表现出来，不易判断出疲劳的类型。同时，疲劳的具体程度也往往难以界定清楚。因为，清除疲劳中必须注意的消除方法的综合性运用，才能收到较好的效果。 　　 3.运动时一定要做好疲劳的预防。在运动训练中，可以采取一定的措施，减少疲劳的产生或减轻疲劳的程度。如了解运动员的身体状况，根据其机体承受能力，科学地制定训练内容和计划，严格遵循训练原则，合理安排运动量和运动强度，适当安排比赛；采取形式多样的训练方法和手段，训练内容不要单打一，注意上、下肢的交替运动；在安排专项练习为主的原则下，可安排一些非专项练习；在练习的休息间隙，穿插一些轻微的活动等等。 　　 　　 参考文献: 　　 [1]夏登波.浅谈运动疲劳的消除[J].海南：体育科研，2001（1）. 　　 [2]张灏，高顺生.运动性疲劳的研究进展[J].北京：北京体育师范学院学报，2000（3）. 　　 [3]毛亚杰,周蔷.对恢复运动性疲劳的探讨[J].武汉：武汉体育学院学报,2001（9）. 　　 [4]丁伟，李逢春.浅议运动性疲劳的恢复[J].内蒙古：内蒙古名族大学学报（自然科学版），2009（7）. 　　 　　 （作者简介：张舒洁（1987-）,女，浙江杭州人,武汉体育学院运功人体专业研究生，研究方向：保健康复。）
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当前位置：----博硕论文分类列表论文搜索&相关论文科目列表&&&&碳酸酐酶Ⅲ与肌肉疲劳之间的关系及其对疲劳消除作用的初步观察&【摘要】： 运动性肌肉疲劳(Exercise-induced muscle fatigue)特指运动引起肌肉产生最大随意收缩力量或输出功率暂时性下降的生理现象，它严重影响运动能力的发挥和体能的恢复，是运动医学领域研究的热点问题。其发生机制极其复杂，涉及中枢运动驱动、神经肌肉接头兴奋一收缩耦联和肌肉能量代谢等多种生理过程，其中肌肉基本化学物质的改变是肌肉收缩速度与强度改变的基础，绝大部分中枢神经系统和神经肌肉接头并没有累及。近来研究发现，骨骼肌碳酸酐酶Ⅲ(CarbonicanhydraseⅢ，CAⅢ)表达水平和／或活性的改变可能与骨骼肌疲劳的发生有关。然而有关肌肉疲劳发生后骨骼肌CAⅢ的表达情况研究尚未见文献报道，此外，如何在体外大量获取纯化的CAⅢ，然后将其转导进入骨骼肌以观察其对肌肉疲劳的影响呢?为解决以上问题，本研究通过大强度跑台运动和低频电刺激的方法建立了大鼠骨骼肌疲劳模型，探讨了骨骼肌CAⅢ水平与肌肉疲劳之间的关系；构建了含有编码TAT-CAⅢ全长DNA序列的质粒表达载体并表达纯化出融合蛋白，观察了TAT-CAⅢ在体内外的跨膜转运能力并通过补充TAT-CAⅢ初步观察了其对肌肉疲劳恢复的影响。本研究分以下三个部分： 第一部分 大鼠骨骼肌疲劳模型的建立及疲劳后肌肉和血清CAⅢ的表达情况目的构建大鼠骨骼肌疲劳模型并观察疲劳后肌肉和血清CAⅢ的表达情况，探讨CAⅢ与骨骼肌疲劳之间的关系。方法36只雄性SD大鼠随机分为对照组、运动组和刺激组。运动组参照Bedford方案进行一次大强度跑台运动制作大鼠急性疲劳模型，刺激组采用低频电刺激的方法诱发大鼠腓肠肌疲劳。Western blot检测大鼠骨骼肌及血清中CAⅢ的表达水平。 结果(1)与对照组相比，运动组大鼠比目鱼肌CAⅢ的表达水平明显降低(P＜0．05)，但趾长伸肌及血清CAⅢ的表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。(2)随刺激时间的延长，大鼠腓肠肌的肌力峰一峰(P-P)值及肌力微分值逐渐降低，与刺激开始时相比，刺激10min即有非常显著的差异(P＜0．01)；而疲劳指数(FI)则随刺激时间的延长逐渐增加，刺激40 min时FI高达52．14％左右。(3)肌电振幅P-P值及EMG时频指标IEMG、MPF和MF值均随刺激时间的延长而逐渐降低。与刺激开始时相比，刺激5min时MPF的变化已有显著的差异(P＜0．05)，而肌电振幅P-P值及IEMG值在刺激10min时方有显著的差异(P＜0．05)；MF值尽管随刺激时间的延长有所降低，但各时间点差异无统计学意义(P＞0．05)。(4)与对照组相比，刺激组大鼠腓肠肌CAⅢ的表达水平明显降低(P＜0．05)，而比目鱼肌及趾长伸肌CAⅢ的表达水平虽均有下降但差异无统计学意义(P＞0．05)。 结论(1)低频电刺激致骨骼肌疲劳后的肌电信号变化与运动性疲劳时sEMG信号变化相似，具有一定的特征，表明大鼠腓肠肌疲劳模型建立成功；(2)急性大强度跑台运动及低频电刺激诱发肌肉疲劳后均可引起相应骨骼肌CAⅢ的表达下调(前者表现为比目鱼肌，后者为腓肠肌)，表明骨骼肌疲劳的发生可能与其CAⅢ的表达下调有关。 第二部分 TAT-CAⅢ融合蛋白的表达、纯化及其跨膜转运功能的鉴定目的构建含有编码CAⅢ和TAT-CAⅢ全长DNA序列的质粒表达载体，并进行诱导表达和纯化，在体内外鉴定TAT-CAⅢ的跨膜转运能力。方法(1)采用PCR的方法扩增编码CAⅢ和TAT-CAⅢ全长的DNA序列，分别重组入pET28a质粒表达载体中，测序鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3)，构建重组体的表达菌株；IPTG诱导后，用Ni-NTA亲和层析柱分离纯化融合蛋白，纯化产物进行SDS-PAGE分析、Western blot鉴定及磷酸酶活性染色；(2)分别以1μmol／L纯化的CAⅢ及TAT-CAⅢ孵育C2C12成肌细胞和PC12细胞1h，间接免疫荧光法检测两者在细胞内的分布情况；然后分别用含0．1、0．5、1．0、2．0μmol／LTAT-CAⅢ的无血清培养基孵育C2C12成肌细胞1h和用含1μmol／LTAT-CAⅢ的无血清培养基孵育细胞15、30、60、120min，间接免疫荧光染色和Hoechst 33342染色观察TAT-CAⅢ细胞转导率与其浓度和孵育时间之间的关系；(3)分别经腓肠肌肌膜外注射200μ1 0．25mg/ml的TAT-CAⅢ和CAⅢ，注射后30min、60min、90min取材，间接免疫荧光法检测TAT-CAⅢ融合蛋白对骨骼肌的穿透作用。 结果(1)成功地构建了含有及不含有TAT的CAⅢ质粒表达载体；转化大肠埃希菌BL21(DE_3)后表达并纯化出相对分子量分别约32 000(CAⅢ)和35 000(TAT-CAⅢ)的融合蛋白，Western blot和酶活性染色鉴定表明成功地获得了两种融合蛋白。(2)分别以一定浓度的融合蛋白孵育C2C12成肌细胞和PC12细胞1h后，TAT-CAⅢ组细胞内可见有较强的绿色荧光，而CAⅢ组细胞内则未见荧光。进一步分析发现，细胞荧光强度随TAT-CAⅢ孵育浓度的增加和孵育时间的延长而逐渐增强且各组细胞转导率均达100％。(3)腓肠肌肌膜外注射TAT-CAⅢ后，荧光显微镜下观察发现骨骼肌中出现大量红色荧光染色阳性的细胞，其中注射60min后荧光强度最高；而阴性对照组和CAⅢ注射组除胞膜上有少许非特异性着色外未见有荧光染色阳性细胞。 结论成功地构建了含有及不含有TAT的CAⅢ质粒表达载体并表达、纯化出融合蛋白；间接免疫荧光染色显示TAT可介导CAⅢ由胞外跨膜转导进入胞内，且转导具有非选择性、效率高和作用迅速的特点。 第三部分TAT-CAⅢ对缺氧复氧诱导的细胞凋亡的影响及其抗疲劳作用的初步观察 目的观察TAT-CAⅢ对缺氧复氧诱导的细胞凋亡和疲劳恢复过程中腓肠肌肌力的影响，初步探讨其在疲劳消除中的作用。 方法(1)流式细胞仪检测TAT-CAⅢ对缺氧复氧诱导的C2C12细胞凋亡的影响；(2)将重组质粒pET28a-TAT-CAⅢ转化表达菌Ecoli．BL21(DE_3)后，采用低温诱导的方法表达和纯化可溶性融合蛋白TAT-CAⅢ并进行鉴定；(3)电刺激至腓肠肌疲劳后，于肌膜外补充TAT-CAⅢ，观察其对疲劳恢复过程中腓肠肌肌力的影响。 结果(1)与OGD组相比，细胞经CAⅢ预处理后行OGD再复糖复氧时细胞凋亡率虽略有降低，但差异无统计学意义(P＞0．05)，而不同浓度TAT-CAⅢ预处理组细胞凋亡率与OGD组相比则有非常显著的差异(P＜0．001)且细胞凋亡率随蛋白孵育浓度的增加而逐渐降低；此外，不同浓度TAT-CAⅢ组与CAⅢ相比亦有非常显著的差异(P＜0．01)。(2)通过低温诱导的方法获得了可溶性的融合蛋白，在非变性条件下对其进行分离纯化，透析浓缩后测定蛋白浓度达1．1mg/ml。(3)电刺激致大鼠腓肠肌疲劳后随恢复时间的延长，腓肠肌肌力逐渐回升，至刺激结束45min时，补充0．2mgTAT-CAⅢ组大鼠腓肠肌肌力与对照组和生理盐水组相比差异均有显著性(P＜0．05)；60min时，补充0．1mg和0．2mgTAT-CAⅢ组大鼠腓肠肌肌力均已接近正常水平，明显高于对照组和生理盐水组(P＜0．05)，而补充CAⅢ组大鼠各时间点腓肠肌肌力水平虽高于对照组和生理盐水组，但差异无统计学意义(P＞0．05)。 结论TAT-CAⅢ预处理可明显减少缺氧复氧诱导的C2C12细胞凋亡，表明转导入细胞的TAT-CAⅢ仍保持了其固有的生理功能；此外，通过低温诱导的方法获得了较高浓度的可溶性融合蛋白TAT-CAⅢ，初步观察到它具有一定程度消除疲劳的作用，这为消除肌肉疲劳提供了新的方法和思路。【关键词】：碳酸酐酶Ⅲ
骨骼肌疲劳
碳酸酐酶Ⅲ
蛋白质转导域
碳酸酐酶Ⅲ
骨骼肌疲劳
【学位级别】：博士【学位授予年份】：2009【分类号】：R87【目录】：中英文缩略词表4-5中文摘要5-8英文摘要8-13前言13-18第一部分 大鼠骨骼肌疲劳模型的建立及疲劳后肌肉和血清CAⅢ的表达情况18-43 材料与方法18-27 实验结果27-34 讨论34-39 参考文献39-43第二部分 TAT-CAⅢ融合蛋白的表达、纯化及其跨膜转运功能的鉴定43-72 材料与方法43-56 结果56-66 讨论66-69 参考文献69-72第三部分 TAT-CAⅢ对缺氧复氧诱导的细胞凋亡的影响及其抗疲劳作用的初步观察72-84 材料与方法72-75 结果75-79 讨论79-82 参考文献82-84全文小结84-85综述85-96致谢96-97发表论文97-98& 论文编号BS562112，这篇论文共98页会员购买按0.35元/页下载，共需支付<font color="#FF元。&&&&&&&&直接购买按0.5元/页下载，共需要支付49元 。我还不是会员，我要！会员下载论文更优惠!还送钱！我只需要这一篇论文，无需注册！直接网上支付，方便快捷！&您可能感兴趣的论文论文标题页数级别 91页硕士论文82页硕士论文57页硕士论文142页博士论文43页硕士论文80页硕士论文48页硕士论文67页硕士论文55页硕士论文74页硕士论文103页硕士论文31页硕士论文105页博士论文45页硕士论文 版权申明：本网站上并没有以上硕士博士论文，而是代理国内某文献提供商的资料代下载，购买充值卡后就可以下载论文全文，或代理直接购买，如果你是作者，需要删除这篇论文介绍，请通过以下QQ或其它联系方式告知我们，将在24小时内删除。&&|
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