第2章习题答案_百度文库
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第2章习题答案
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关于目的基因导入pet-28a中是否会发生移码问题!
本人想用pet-28a作为表达载体,引物 已经设计完了,才意识到移码的问题.想问问怎么看我的目的基因导入进28a后是否会发生移码呢?我选的酶切问点分别是BamHI和HindIII, 需要看目的基因序列吗?还是看引物?我在我的酶切位点前面加了2-3个保护碱基:CG GGATCC CG& &BamHI
& && && && & CCC AAGCTT GGG& &HindIII
引物分别是:5`&CG GGATCC CG ATGTCTCTTCGACGTATTCTC&3`
& && && && && && & 5`&CCC AAGCTT GGGTCAGCAGTACAGGTTGCC&3`
如果发生移码了,是不是需要从新设计引物P目的基因序列?
下面是CDS序列,新手,勿怪!
ATGTCTCTTC GACGTATTCT CGCGGCGGTCGCCGCCACCTTCGCCGCCACCACGGTCGCCGTGGTCGTCC
CGACGCAGTCCGCCTCCGCCGCGGACTGCGTGGCGCCGTGGAACGCGAGTTCGGTCTACTGGGGCGGCAA
CACCGCGTCCTACAACGGGCACAACTGGTCCGCGAAGTGGTGGACGCAGAACGAAACCCCAGGTGCAGCG
CAGGTCTGGGCCGATCAGGGCGCCTGCGGCGGCGGGACGACCAACCCGCCGAACCCGTCCGGCTTCGTGG
ACAGTTCAACCAGATGTTCCCGAGCCGGAATCCCTTCTACACCTACAACGGCCTGGTCAC
CGCGCTCAGCGCCTACCCGGCCTTCGCGGGCACGGGCAGCGACACCGTGAAGAAGCAGGAAGCGGCGGCC
TTCCTGGCGAACGTCAGCCACGAGACCGGCGGACTGGTCCACATCGTCGAGCAGAACGAAGCGAACTACC
CGCACTACTGCGACACGAGCCAGTCCTACGGCTGCCCCGCCGGCAACGCCGCGTACTACGGCCGCGGCCC
GATCCAGCTCAGCTGGAACTTCAACTACAAGGCCGCCGGCGACGCGCTCGGCCTGCCACTGCTGACCAAC
CCGTGGCTGGTGCAGAACGACGCGGCGGTCGCCTGGAAGACCGGCATCTGGTACTGGATGACCCAGAACG
GTCCCGGCACGATGACCCCGCACAACGCGATGGTCAACAGCCGCGGCTTCGGCGAGACGATCCGCAGCAT
CAACGGGAGCATCGAGTGCAACGGCGGCAACCCCGCCCAGGTGCAGAGCCGCGTGAACAAGTACCAGCAG
TTCACCGGCATCCTCGGCGTCACCCCCGGCGGCAACCTGTACTGCTGA
移不移码，是从载体上看的，载体上开始翻译的ATG，三个三个数，看是否正好到你的ATG正好是3的整数倍。 重新扩吧，和我一样的问题， 你不是从ATG扩的吗？这样没有没有问题啊 : Originally posted by whh2013 at
重新扩吧，和我一样的问题， 恩,从新设计了一条引物 : Originally posted by bolysu at
移不移码，是从载体上看的，载体上开始翻译的ATG，三个三个数，看是否正好到你的ATG正好是3的整数倍。 上面那条引物应该是会移码,我又加了一个保护碱基.5`&CGc GGATCC CGc ATGTCTCTTCGACGTATTCTC&3`,这样应该就不会了吧 : Originally posted by whh2013 at
你不是从ATG扩的吗？这样没有没有问题啊 但是转进pet-28a就会移码啊 没有仔细看你的片段，但是问一句：你的片段自带终止子，还是用载体上的？如果自带酒没问题，如果用载体上的，依然要考虑片尾移码的问题。 不懂为何你要在BamHI中间塞入碱基，因为你既然选择了BamHI作为第一个酶，那么你就默认了需要用到载体本身上的5‘His,这样的话你的第一条引物塞入了2个碱基，所以后面ORF肯定移码，你要么不塞，要么塞3的倍数，但是个人建议不要塞 : Originally posted by
不懂为何你要在BamHI中间塞入碱基，因为你既然选择了BamHI作为第一个酶，那么你就默认了需要用到载体本身上的5‘His,这样的话你的第一条引物塞入了2个碱基，所以后面ORF肯定移码，你要么不塞，要么塞3的倍数，但是个 ... 我也建议不要塞 : Originally posted by
不懂为何你要在BamHI中间塞入碱基，因为你既然选择了BamHI作为第一个酶，那么你就默认了需要用到载体本身上的5‘His,这样的话你的第一条引物塞入了2个碱基，所以后面ORF肯定移码，你要么不塞，要么塞3的倍数，但是个 ... 谢谢前辈的指教，我们老师要求加入保护碱基，本来我也是不打算加的，不过查阅资料说加入保护碱基后酶切时会更高效地切开。浮点数的表示中为什么要用移码表示阶码？
用移码的意义何在？先行谢过
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因为浮点数的阶码表示指数大小，有正有负，对每个阶码都加上一个正的常数（称偏移常数），使能表示的所有阶码都为正整数，这就变成“偏移”了的阶码也就是移码，浮点数小数点的实际位置由移码减去偏移常数来决定。
你可以想一下，如果我们比较两个向量，是不是要把它们平移到同一起点譬如坐标原点。所有数加同样一个数，然后无论正负阶码都成为正的了。
便于浮点数比大小。如果阶码（指数）也用补码来表示，就会使得一个浮点数中出现两个符号位：浮点数自身的和浮点数指数部分的。这样的结果是，在比较两个浮点数大小时，无法像比较整数时一样使用简单的无逻辑的二进制比较。故而浮点数的指数部分采用了移码（无符号整数）来表示。1554人阅读
&&原码、反码、补码其实两年前就讲过,只是当时的理解太过肤浅或者直接说就是没有理解,因为对于数学比较发怵的我看到那么多的公式很是脑袋大，所以想要硬记也记不住。这次讲课的时候好歹知道了运算规则，但别人一问为什么，立马那个冏啊~好了，废话不多说了，开始进入正题（如果我的理解有偏差，恳请各位大虾不吝指出）：
& & 一张图胜过千言万语，下面的这张是本篇想要说的大概内容
& & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & &
& & 我们知道，计算机是以0和1进行运算的，而且内部只有加法运算器，但日常生活中使用的却是十进制，并且有正负之分。于是我们发明了原码：最高位存放符号（正数用0表示，负数用1表示），其余为真值位。这样就可以方便的进行算术运算了。但很快，我们发现在进行加、乘、除的时候结果均正确，减法却出现了一些问题，下面举个例子：
假设计算机的字长为8 byte，那么
& & & & & & & & & &（2）D&-（2）D&= （2）D&+（-2）D&= （0）D&&&D表示十进制
& & & & & & & & & &（）原+（）原=（）原=（-4）D
& & 以上结果用原码进行计算的显然不正确。因为正数计算的时候没有问题，那么肯定出现在负数身上，为了解决这个问题，我们引入了反码：对负数的原码符号位不变，真值位进行逐位取反。反码的运算如下：
& & & & & & & & （1）D-（2）D=（-1）D
& & & & & & & & （）反+（）反=（）反=（）原=（-1）D
& & 而对于在原码中提到的十进制2-2=0的算法如下：
& & & & & & （）反+（）反=（）反=（）原=（-0）D
&&&&&&&& 发现得到的结果是-0！而在我们的日常计算中，0是不分正负的。为了解决这个问题，我们引入了补码：对负数的补码真值位加1。如果最高位（符号位）有进位，则进位被舍弃。
&&&&&&&& 在补码中用（-128）D代替了（-0），故补码的表示范围为（-128~0~127）共256个。需要注意的是：（-128）D没有对应的原码和反码。补码的十进制2-2=0的运算如下：
& & & & & & （）补+（）补=（）补=（）原=（0）D
&&&&&&&& 可以发现补码的运算无误（大家感兴趣的话可以使用其他式子练习），因此，在计算机系统中，数值一律使用补码进行存储，它能将符号位和真值位统一进行处理。
&&&&&&&& 但是我们不能高兴的太早，还有一个问题：大家有没有发现（-2）D的原码、反码、补码分别大于（2）D的原码、反码、补码？这跟我们日常的认知不相符，为了解决这个问题，我们引入了移码的概念（其实这个并不是移码的来历，只是为了好记一些而已）：如果机器字长为n，规定数X上增加一个偏移量2n-1。那么，这个时候
& & & & & & & & [-2]移=27+（-2）D&=（1000000）补+（）补=（）补
& & & & & & & & [2]移=27+（2）D&=（）补+（）补=（）补
& & & & & & & & [-2]移&[2]移
& & 终于把我要说的说完了，虽然费了不少的劲去整明白来龙去脉，但明白了原理之后再进行计算就相当容易了。以后的学习中也应该去养成这个习惯，知其然知其所以然，多问几个为什么，当不知道答案的时候说明肯定对这部分的知识还没有掌握到位。接下来，努力吧，少年！
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