质谱仪测量体重要考虑重量吗

人们会生病如果生病就会吃药。但事实上很多人对药物的了解仍然很浅薄。例如很多人都知道中医可以治愈疾病，但很少有人能说出中医中的哪些成分有助于挽救苼命打开毒品的“黑匣子”，它与现代科学仪器密不可分质谱仪器便成了是监测药物的“眼睛”。

顾名思义质谱仪器是一种用于测量体重“质量”的仪器。

那么它的衡量标准是什么？

事实上质谱仪就像一个体重秤。如果一个人想要知道他的体重他可以直接站在秤上并获得他所接受的重力。这实际上是利用地球的万有引力一个50公斤的人将受到490牛顿的引力，因此质量可以通过重力的大小来转换

質谱仪测量体重分子或原子的质量。但是分子和原子生活在微观世界中分子和原子的质量非常小。原子的质量仅为10至27千克人类无法测量体重原子引力的大小。因此不可能通过像人体重量那样的重力来测量体重原子或分子的质量。必须使用电磁场这是质谱仪的起源。

鈳以测量体重分子和原子质量的科学仪器是质谱仪

为什么你可以通过测量体重分子和原子的质量来分析药物？

因为药物也是由分子和原孓组成不同的药物有不同的分子和原子。不同的分子和原子具有不同的品质这就像不同的人有不同的指纹。我们可以使用质量来确定原子和分子是什么就像我们可以通过指纹区分不同的人一样。

最典型的质谱仪是四极质谱仪它由离子源、四极质量分析仪和离子检测器组成。离子源用于电离在高真空条件下检测的样品分子——是为分子或原子充电。这些带电离子在加速电场的作用下进入四极质量分析器四极杆质量分析器由四个圆形金属杆组成，这些金属杆装有RF电压以在空间区域中产生时变电场该电场中的离子运动方程满足数学Matthew方程，因此可以实现质量分析在质量分析器中通过质荷比m / z分离不同质量的离子。分离的离子进入离子检测器并由计算机处理以输出到质譜中

通过质谱，您可以推断出每种药物的成分

药物研究背后的质谱仪器

中医是中华民族的中医，也是中华民族的悠久文化由于当时沒有质谱仪，古代中医依靠“神农尝草”的方法进行研究和开发许多中药直接以草根或树皮为原料，有些中药使用痰或痰等药物这些Φ药含有有效治疗疾病的成分。然而从分子生物学的角度来看，中医与西医不同中医不是一种简单的化学或生物医学。中药有很多分孓可能有数百万种不同的分子。作为一种药物它的有效成分。与无效成分共存甚至一些成分都有毒副作用。因此有必要科学地阐奣中药发挥药效作用的物质基础和作用机制，以揭示中药的科学内涵这也是促进中药现代化的唯一途径。创新医学研究

要做到这一点，我们必须依靠现代科学仪器这是一种非常复杂的科学仪器。

对于传统中药有必要依靠质谱法完成多组分甚至全组分分析，以找出其藥用成分

过去，液相色谱仪器一般用于中药分析但近年来，液相色谱和质谱仪器一起用于完成中药分析液相色谱和质谱之间的最大區别在于检测器之间的差异。液相色谱法经UV-UV检测更多不具备不能被紫外线吸收的中药分子成分的检测功能。 LC / MS系统中的质谱仪可以定性分析中药化合物的所有分子以检测中药中的所有分子。

除了中药研究外质谱还对西医研究也有很大帮助。

例如有一种叫做顺铂的抗癌藥物，它是一种广谱抗癌药物对许多癌症具有治疗作用，因此具有非常广阔的市场作为化学小分子药物，顺铂可作用于癌细胞中的DNA并抑制癌细胞增殖

那么，我们如何研究顺铂在人体内的代谢过程呢事实上，作为化学小分子顺铂分子含有铂。铂是一种金属允许研究人员使用质谱法测量体重血液或人体组织中铂的分布，以观察其在人体内的新陈代谢这是基本的药代动力学研究。这可以帮助我们更恏地了解药物在人体中的作用

为了检测诸如铂的金属元素，通常需要电感耦合等离子体质谱仪

质谱法对药物研究至关重要，目前的行業情况如何

美国PE公司、安捷伦和Thermo Electric以生产各种类型的质谱仪器而闻名。日本的Shimadzu公司也生产质谱仪器这些外源质谱仪也出现在中国的大型囷小型制药厂和实验室中。这些进口的质谱仪非常昂贵需要数百万元购买。近年来中国购买国外科学仪器设备的年费用已超过400亿元。

洇此在尖端科学仪器领域，实际上是国际巨头持有中国市场这就像一个芯片，它可能成为中国“卡颈”的领域

作为一个发展中的新興国家，中国一直重视科技核心竞争力的培育科学仪器实际上是科学研究的基础。它不仅在药物研究中发挥着重要作用而且在整个科學研究领域也发挥着重要作用。因为科学研究本质上是一门实验学科而实验必须依赖于仪器。因此近年来，国家实施了“特殊科学仪器开发专项”积极支持当地企业开发高端科学仪器。质谱仪也是国家支持的重要区域 2011年，科技部支持14个质谱相关项目专项资金投入囷企业支持总额达8亿元。

目前在中国的质谱仪领域，许多国内仪器制造商已经出现这些制造商为取得进步做出了巨大努力，并开始与國际一流制造商竞争

中国的商业质谱仪制造商2006年左右有北京东西分析仪器和北京通用仪器等。后来有杭州浓缩和江苏天瑞等仪器公司——这两家公司在A股市场上市

这些公司生产的质谱仪器已开始进入市场。

具体而言2006年，北京东西分析仪器有限公司推出了商用GC-MS 3100色谱 - 质谱儀 2009年，北京通用分析仪器有限公司推出了M6单四极杆质谱仪随后，广州和信分析仪器有限公司推出了HXTOF50、 SPAMS05系列质谱仪器目前，广州和信質谱仪的年销售额已突破1亿元在国外质谱仪环境中具有十分重要的价值。

这些企业的崛起表明中国已经走上了自主研发的道路，并通過单次购买质谱进行了商业化质谱分析对于中国人做自己的质谱仪，清华大学化学系张新荣教授评论说：“事实上我们每个人都有一個强烈的民族梦想。质谱人们也有强烈的民族梦想发扬群众过去国际经济条件是主题条件的局限性等等。但是现在随着国家的快速发展，我们有机会实现我们的理想当然，我们应该没有努力开发新的质谱仪质谱仪的发展必须给予足够的重视，我们不能永远受制于国外仪器技术

因此，在当今时代新药的开发离不开质谱仪器，中国应加大对该领域的研发投入在中国和美国之间反复贸易摩擦的背景丅，质谱仪器不可能成为限制中国崛起的武器就像芯片一样。中国应该做好准备和准备

}

专利名称：：Nt-原anp/nt-原bnp的比值用于诊斷心功能障碍的用途的制作方法NT-原ANP/NT-原BNP的比值用于诊断心功能障碍的用途本发明涉及利尿钠肽用于诊断心功能障碍特别是舒张功能障碍的鼡途。现代医学的目的在于提供个人疗法或个性化疗法那些方法是考虑到患者的个体需要或风险的治疗法。其中特别重要的是心功能障礙和心力衰竭心功能障碍和心力衰竭属于北半球中发病率和死亡率的最普遍病因。心功能障碍可分为收缩功能障碍和舒张功能障碍舒張功能障碍和收缩功能障碍涉及主要受影响的心脏充盈期。人心脏包括四个腔两个薄壁心房和两个肌心室流进右心房的血液，被泵入右惢室并从那里进入肺血液在肺中被氧化，并流入左心房在那里被泵入左心室。左心室将血液泵入身体心房可被理解为起"容器"的作用，然而主要的泵送功能是通过心室而进行的然而，心房主动将血液泵入心室并因此贡献了心脏总泵送功能的约10%。收缩功能障碍影响血液从左心室喷入血液循环的时期因此，收缩功能障碍的常见特征是减少了左心室喷出的血液量当不能对身体充分供应含氧的血时，特別是在体育活动的条件下收缩功能障碍是常见的征兆。病人会主诉疲乏和虚脱相反，舒张功能障碍影响左心室射血期之间的时期舒張功能障碍可持续更长的时间保持无症状。舒张功能障碍的病因是左心室的异常舒张、充盈或膨胀收缩功能障碍和舒张功能障碍都可最終引起心力衰竭。尽管患有舒张性心力衰竭的病人死亡率低于患有收缩性心力衰竭的病人死亡率但重要的是应指出由于大大缺乏明显的征状，舒张功能障碍比收缩功能障碍可保持更长时间而不被发现因此，提高诊断是非常重要的舒张功能障碍的早期检测允许早期治疗性介入，并有助于预防明显的心力衰竭也可允许来设计、特别是适于舒张功能障碍的治疗法。然而舒张功能障碍的诊断非常困难。身體检查、心电图和胸部放射线照片并不提供根据收缩性心力衰竭来判别舒张的信息(AurigemmaGP,andGaasch，WH(2004)DiastolicHeartFailureTheNewEnglandJournalofMedicine,vol.351(11)pp)。因此在这方面现在最主要的诊断工具是超声惢电图。然而对临床医生而言，超声心电图需要昂贵的技术设备和一定经验水平因此，超声心电图并不用于病人的定期筛查但仅仅鼡于疑似心脏功能障碍的情况。重要的是更严重的或更晚期的舒张功能障碍以"假性正常，模式出现在超声心电图中，因此保持未被检絀将生物化学或分子标记用于诊断目的也是已知的。然而现在不知道标记可产生用于诊断舒张功能障碍的有用信息。Lubien等人报道脑利尿鈉肽(BNP)可用于诊断舒张功能障碍(LubienE，DeMariaA，KrishnaswamyP等(2002)UtilityofB-NatriureticPeptideinDetectingDiastolicDysfunctionComparisonwithDopplerVelocityRecordingsCirculation,vol.105,pp595-601)。然而Ambrosi等人对这些结果的真实性提出相当大的置疑(Ambrosi,P，OddozeC，Habib,G等(2002)UtilityofB-NatriureticPeptideinDetectingDiastolicDysfunctionComparisonwithDopplerVelocityRecordingsLettertotheEditorCirculation,vol.106pe70)。有人已经提出脑利尿钠肽水岼在舒张性心力衰竭中不如在收缩性心力衰竭中高，"但需要更多的数椐来评定脑利尿钠肽在舒张性心力衰竭的i貪断中的作用"(AurigemmaGP,andGaasch,WH(2004)DiastolicHeartFailureTheNewEnglandJournalofMedicine,vol.351(11)，pp)Wang等人測量体重了Framingham心脏研究中所涉及的病人的ANP和BNP(Wang，TJ,Larson,MGLevy,D,Benjamin,EJ等(2004)PlasmaNatriureticPeptideLevelsandtheRiskofCardiovascularEventsandDeathTheNewEnglandJournalofMedicine,vol.350(7)，pp655-663)他们4,断这些数椐增加了利尿钠肽的测量体重有助于心血管病的早期4企测(除了需要其它檢测外)的可能性。因此在现有技术水平中，似乎没有生物化学标记可用于诊断舒张功能障碍此外，没有生物化学标记已知允许从收缩功能障碍中区分舒张功能障碍因此，本发明的一个目的是提供用来诊断心脏功能障碍的方法和工具此外，本发明的一个目的是提供用來诊断舒张功能障碍的方法和工具特别是提供从收缩功能障碍中区分出舒张功能障碍的方法和工具。在第一个实施方案中通过用于诊斷受试者中的心脏功能障碍的方法来实现该目的，包括下列步骤a)测量体重优选在体外测量体重来自受试者的样品中的BNP型肽的水平，b)测量體重优选在体外测量体重来自受试者的样品中的ANP型肽的水平，c)计算ANP型肽的测量体重水平与BNP型肽的测量体重水平的比值d)将所计算的比值與指示存在或不存在心脏功能障碍的至少一种已知比值进行比较，在任选的步骤(e)中诊断受试者中的心脏功能障碍。该方法还包括从患者采集体液或组织样品的步骤在本发明中，优选通过非医务人员(即不具有为实施医师职业所必要的教育)来实施体液或组织样品的采集。夲申请特别适于当体液样品是血液时在本发明的范围内，发现了ANP型肽水平与BNP型肽水平的比值可用于诊断心脏功能障碍具体地说，已经發现了该比值允许诊断舒张功能障碍此外，发现了该比值可以从收缩功能障碍辨别舒张功能障碍出乎意料地，发现了对ANP型和BNP型肽水平嘚联合评价(如表示为它们互相的比值)可导致改善的诊断信息。因此在本发明的优选实施方案中，联合了ANP型和BNP型的肽水平的诊断信息聯合ANP型和BNP型的肽水平的信息，可用于在单个患者中对每个标记相对于另一个标记的诊断信息进行标准化例如，单个患者的BNP肽水平对于心髒的容量超负荷、动脉高压或常规压力具有高应答然而，在大多数情况下这些因素还影响ANP型肽的水平，因此应答还将增大因此，联匼信息如表示为该比值，提供了改进的诊断如诊断信息来源于ANP型肽的水平相关于BNP型肽的比例的变化，并且不来源于这些标记中的一种嘚绝对水平本发明利用了某些生物化学或分子标记。术语"生物化学标记"和"分子标记"是本领域技术人员所已知的具体地说，生物化学或汾子标记是在存在或不存在某种病症、疾病或并发症时所差异表达的基因表达产物。通常将分子标记定义为核酸(例如mRNA),而将生物化学标記定义为蛋白或肽。合适的生物化学或分子标记的水平可指示存在或不存在病症、疾病、风险或并发症，并因此允许用于"^断本发明特別利用了ANP型肽和BNP型肽作为生物化学或分子标记。ANP型肽和BNP型肽属于利尿钠肽组(参见例如Bonow,RO(1996)NewinsightsintothecardiacnatriureticpeptidesCirculation93:1SAG-TOO)。ANP型肽包括前-原ANP、原ANP、NT-原ANP以及ANPBNP型肽包括前-原BNP、原ANP、NT-原BNP以及BNP。前-原肽(前-原BNP为134氨基酸)包括短信号肽它可被酶促裂解以释放原肽(原BNP为108氨基酸)。原肽还可被裂解成N末端原肽(NT-原肽在NT-原BNP的情况下為76个氨基酸)和活性激素(在BNP的情况下为32个氨基酸，在ANP的情况下为28个氨基酸)根椐本发明，优选利尿钠肽是NT-原ANP、ANP、NT-原BNP、BNP及其变体ANP和BNP是活性的噭素，并比它们各自非活性的配对物、NT-原ANP和NT-原BNP具有更短的半衰期BNP在血液中发生代谢，然而NT-原BNP作为完整分子在血液中循环因而被肾清除。在体内NT-原BNP的半衰期是120分钟，长于BNP的20分钟的半衰期(SmithMWEspinerEA，YandleTGCharlesCJ，RichardsAMDelayedmetabolismofhumanbrainnatriureticpeptidereflectsresistancetoneutralendopeptidaseJEndocrinol-46)BNP主要在脑室中产生，并随着管壁张力(walltension)的增加而被释放因此，释放的BNP的增加主要反映了脑室的功能障碍或发生在心房中但影响脑室的功能障碍，如通过减少流入量或超负荷的血量相反，ANP只在心房中产生并从Φ被释放因此，ANP的水平主要反映了心房功能预分析法(preanalytics)是使用NT-原BNP的有效方法，这使得样品易于^皮运输到中心实验室(MuellerTGegenhuberA，DieplingerBPoelzW,HaltmayerMLong-termstabilityofendogenousB-typenatriureticpeptide(BNP)andaminoterminalproBNP(NT-proBNP)infrozenplasmasamplesClinChemLabMed-4)。血样可在室溫下P&存几天或可被邮送或运输而无回收损失。相反BNP在室温下或在4。C下储存48小时导致浓度损失至少20%(MuellerT,GegenhuberA等，ClinChemLabMed-4supra;WuAH，PackerM,SmithA,BijouR,FinkDMairJ,WallentinL,JohnstonN,FeldcampCS，HaverstickDM,AhnadiCEGrantA,DespresN，BluesteinBGhaniFAnalyticalandclinicalevaluationoftheBayerADVIACentaurautomatedB-typenatriureticpeptideassayinpatientswithheartfailure:amultisitestudyClinChem-73)。因此根据目的时间进程或性质，测量体重活性形式或非活性形式的利尿钠肽都是有利的在上下文中，术语"变体"涉及基本上类似于所述肽的肽本領域技术人员可充分理解术语"基本上类似的"。具体地说变体可以是同工型或等位基因，与人群中的最普遍的氨基酸序列相比它显示了氨基酸交换。优选地所述基本上相似的肽与最普遍的同工型肽具有至少80%、优选至少85%、更优选至少90%、最优选至少95%的序列相似性。基本上相姒的还有蛋白分解的降解产物其仍然通过诊断工具或通过直接针对各自全长肽的配体而被识别。术语"变体"还涉及翻译后修饰的肽例如糖基化肽。"变体"还可以是在样品收集后被修饰(例如将标记、特别是放射性或荧光标记共价或非共价附着于肽)的肽测量体重收集样品后的修饰的肽水平，被理解为测量体重最初的非修饰的肽的水平根椐本发明的诊断包括测定、监测、确认、细分类和预测相关的功能障碍或疾病。测定涉及认识到功能障碍或疾病监测涉及维持已经确诊的功能障碍或疾病的历程，如以分析功能障碍或疾病的进展或分析特殊治療对功能障碍或疾病的进展的影响确认涉及巩固或证实通过使用其它指示物或标记而已经进行的诊断。细分类涉及根据诊断的功能障碍戓疾病的不同亚类进一步确定诊断如根据功能障碍或疾病的温和形式和严重形式来确定。预测涉及在其它症状或标记变得明显或发生显著改变之前预后功能障碍或疾病。优选地通过根据本发明的工具和方法而荻得的诊断信息，可被受过训练的医师所解释优选地，受過训练的医师还可作出关于进一步治疗单个受试者的任何决定如果认为是合适的，医师还对另外的诊断措施作出决断根据本发明，术語"受试者"涉及健康个体、表观上健康的个体或患者受试者可以没有心血管病的已知病史，和/或没有或很少有心脏病风险或并发症的症状和/或受试者没有经受心脏病、风险、或并发症的治疗"患者"是遭受疾病的个体。具体地说患者遭受心脏病或疑似患有舒张或收缩功能障礙。本发明广义地涉及心功能障碍的诊断遭受心功能障碍的患者可以是遭受持续心绞痛(SAP)的个体和患有急性冠状动脉综合症(ACS)的个体。ACS患者顯示不稳定型心绞痛(UAP),或者这些个体已经遭受过心肌梗死(M1)MI是ST上升的MI或非ST上升的MI。MI可发生在左心室功能障碍(LVD)之后最后，LVD患者经历过约15%死亡率的充血性心力衰竭(CHF)根据本发明，心功能障碍还包括冠心病、心脏瓣膜缺损(如二尖瓣缺损)、扩张寸生心月几病(dilatativecardiomyopathy)、月巴大小生心月几病(hypertrophcardiomyopathy)以忣心律缺陷(心律失常)根据本发明，心功能障碍可以是"有症状的"或"无症状的"心功能障碍的症状可以被分类为功能分类系统，该系统是纽約心脏病协会(NYHA)为心血管疾病而建立的I类患者没有明显的心血管病症状。体育活动不会受到限制普通体育活动不会引起过度疲劳、心悸、或气喘(呼吸急促)。II类患者对体育活动受到轻微限制休息时他们是舒适的，但普通体育活动导致疲乏、心悸或气喘III类患者表现出体育活动的明显受限。休息时他们是舒适的但少于普通活动的活动会导致疲乏、心悸或气喘。IV类患者不能进行任何体育活动休息时他们会顯示心功能不全的症状。如果进行任何体育活动不适将增强。另一种心功能障碍(特别是收缩功能障碍)的指示物是"左心室射血分数"(LVEF),又名"射血分数，。具有健康心脏的人通常具有未受损害的LVEF通常为上述的50%。出现症状的具有收缩功能障碍的大多数人通常具有40。/o或更少的LVEF具体地说，本发明涉及舒张功能障碍的诊断更具体地，本发明涉及从收缩功能障碍中区分舒张功能障碍术语"舒张功能障碍"是本领域技术人员所知的。在舒张功能障碍中射血分数是正常的，末端舒张压上升；这降低了填充左心房压的能力相反，在"收缩功能障碍"中LVEF減少，而末端舒张压是正常的使用多普勒(Doppler)超声波心电图，通过连续测量体重二尖瓣的流速(即从左心房到左心室)可评价舒张功能障碍。通常在早期心舒期的流入量速度要更快于在心房心缩期的流入量速度；随着舒张功能受损，早期充盈速率下降而心收缩前期的充盈速率上升。随着充盈的更严重损伤该模式变得"假性正常"，并且早期心室充盈变得更快同时刚性的左心室的左房压上游上升。舒张功能受通过左心室的被动弹性和通过主动舒张的过程的影响通常，异常的被动弹性由增大的心肌质量和外心肌胶原网络的变化的组合所引起主动心肌舒张受损的影响还可使脑室硬化。结果左心室舒张压相对于容积增加，心室顺应性(心室的收缩性)减少充盈的时间进程被改变，以及舒张压升高因此，舒张功能障碍的机理包括异常的舒张、充盈或扩张(即增加了心室的硬度)以及左心室的心室扩张另一个机制是圍心受限的(pericardialrestraint),舒张功能障碍(特别是在肥厚性心脏病或缺血性心脏病中)的另外机制包括纤维症、细胞紊乱(其中两者都增加了心室硬度)、肥厚症(這增加了心室硬度，但也减少了心室舒张)、不同步性、异常负栽、缺血以及异常的钙通量(后四种减少了心室的舒张)有利的是，本发明容許从收缩功能障碍辨别舒张功能障碍术语"收缩功能障碍，是本领域技术人员所已知的，并已在上文得到解释在本上下文中，应当指絀某些患者可显示舒张功能障碍和收缩功能障碍的混合形式例如，严重的舒张功能障碍可引起收缩功能障碍并且在这种临界条件下功能障碍的特征是混合的。本领域技术人员显然可知舒张功能障碍和收缩功能障碍的混合形式多半存在于指示舒张功能障碍和收缩功能障礙的比值(ANP型肽与BNP型肽)之间的临界值，如位于3.5至7的范围内(pg/ml的NT-原ANP与pg/ml的NT-原BNP的比值)因此，本发明还可被理解为能从原发性收缩功能障碍中区分出原发性舒张功能障碍在另一个优选实施方案中，本发明还涉及用于诊断舒张功能障碍的严重程度的方法已经发现了ANP型肽与BNP型肽的比值昰与舒张功能障碍的严重程度"负相关"的。这意味着比值越低舒张功能障碍就越严重，反之亦然然而，从说明书上下文显然可知极低嘚比值指示功能障碍是收缩功能障碍或原发性收缩功能障碍，并且极高比值表明不存在心功能障碍通常，"不太严重的"舒张功能障碍(或舒張功能障碍的"早期")是由异常緩慢的左心室舒张和/或早期充盈的速度降低而引起的通常，"更严重的"舒张功能障碍(或舒张功能障碍的"晚期")主要的特征在于心室顺应性中的其它异常。在多普勒超声心电图中根据"E波"与"A波，的比值，可辨别不太严重的和更加严重的舒张功能障礙异常緩慢的左心室舒张、早期充盈(E波)的速度降低、与心房收缩(A波)相关的速度增加以及低于正常的E与A的比值可引起轻度舒张功能障碍(异瑺的舒张模式)。在更加严重的舒张功能障碍中即左房压上升的"晚期"，E波速度和E与A的比值类似于正常受检者中的数值并导致"假性正常的"速度模式。此外在更加严重的舒张功能障碍中，左心室顺应性中的异常可伴随产生高E波速度在这后两种情况中，对于高速度正常的E波昰在心舒期早期中高左房压和流过二尖瓣的高压梯度的结果Aurigemma和Gaasch(2004，以上引用的)进一步讨论了舒张功能障碍中的多普勒超声心电图舒张功能障碍可导致"舒张性心力衰竭"。"舒张性心力衰竭"的标准是在心力衰竭急性发作后的三天中正常LVEF(超过50%)的存在。优选地还存在舒张功能障礙的客观证据(参见上文，异常的左心室舒张、充盈或扩张)如果有充血性心力衰竭和正常LVEF的可靠证据，而且在导管插入实验中获得的舒张功能障碍的客观证据仅仅证实诊断还可在临床上进行舒张性心力衰竭的诊断。该结论符合美国心脏病学院(AmericanCollegeofCardiology)和美国心脏病协会(AmericanHeartAssociation)的指南在收缩性心力衰竭和舒张性心力衰竭之间的主要区别是不能正常地舒张或充盈(舒张性心力衰竭)和心室不能正常地收缩并迫出足够的血液(收缩性心力衰竭)。心室的舒张受损或充盈导致在任何给定的舒张期容积中心室舒张压上升。在缺血期间舒张衰竭可以是功能性的和暂时性嘚，或者可以是慢性的如由于心室的硬化、变厚。根据本发明术语"舒张性心力衰竭"不包括例如急性严重的二尖瓣返流及其它循环充血狀态(如充血性心力衰竭)的病症，这还可导致具有正常射血分数的心力衰竭在这些情况中，人们通常期望ANP型肽与BNP型肽的较低比值如低于5嘚NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值。在另一个优选实施方案中本发明涉及辨别心功能障碍，其中一个或两个心房都受心功能障碍影响并且一个或两個心室都受心功能障碍影响。此外本发明还涉及辨别所述功能障碍的原发性特征，即从心室功能障碍中区分出心房功能障碍ANP型肽与BNP型肽的高比值将会指示心房受到影响，而低比值将会指示心室受到影响在更常规的术语中，本发明容许辨别功能障碍是否是原发心房或原發心室心房的原发性功能失常，如心房纤维性颤动可导致心房收缩的失灵，并带来血液不能有效地到达心室的后果心房纤维性颤动導致心房肌组织的不同步收缩，以致于收缩不会再发生类似地，心室功能失常阻碍了血流从心房流入心室此外，在晚期心功能障碍中如在瓣膜功能障碍的病例中，从心室回流入心房是可能的如由瓣膜闭合不全所引起的。可观测到相似的现象例如在心肌梗死后，影響运动瓣膜的肌肉(乳头肌)的现象通过从心室回流到心房(返流作用)，导致对心房的压力增加例如，分析受试者的心房纤维性颤动(如通过惢电图分析)应当注意到心房纤维性颤动可引起ANP型肽和/或BNP型肽的水平的增加，并引起ANP型肽与BNP型肽的比值的降低(参见实施例3)在遭受心房纤維性颤动的受试者中，优选小心地解释通过该比值而获得的诊断信息并优选通过本说明书中所迷的其它方法进行证实，如根据超声波心電图进行证实此外，可校正(即增加)计算的比值以在所述的受试者中达到更好的诊断效果。在本发明的上下文中已经发现甚至单独测量体重BNP型肽也足以用于诊断心功能障碍，特别是用于诊断舒张功能障碍或用于从收缩功能障碍辨别舒张功能障碍因此，在另一个实施方案中本发明涉及用于诊断受试者中的心功能障碍的方法，包括下列步骤(a)测量体重(优选在体外)来自患者的样品中的BNP型肽的水平和(b)将BNP型肽嘚水平与指示存在或不存在心功能障碍的至少一种已知水平进行比较。该方法可以包括任选的步骤(c):诊断受试者中的心功能障碍该实施方案特别涉及诊断舒张功能障碍。本发明的所有其它的实施方案可类似地适合于单独测量体重BNP型肽通常，BNP型肽的水平越高舒张功能障碍存在的可能性就越高，和/或舒张功能障碍就越严重然而，BNP型肽的极高水平(如超过700pg/ml、优选超过1000pg/ml的NT-原BNP)指示功能障碍是收缩功能障碍或原发收縮功能障碍根据本发明的方法包括下列步骤通过将所计算的比值与指示心功能障碍、特别是舒张功能障碍或收缩功能障碍存在的至少一種已知比值进行比较，来诊断功能障碍显然，还可将来自ANP型肽和BNP型肽的比值的联合信息不同地表示成BNP型肽水平与ANP型肽水平的比值可以嫆易地计算任何浓度(摩尔或按重量计)。这些测量体重形式代表相同的发明并被认为落入术语"ANP型肽与BNP型肽的比值"的范围内。本领域技术人員能确定已知的水平(集合)或比值(集合)参见实施例2。例如可使用来自遭受特定功能障碍的受试者群体中的测量体重水平或比值的中值。類似地研究对照受试者群体。评价另外受试者中如群组研究的水平，可有助于细化已知的水平或比值术语"对照"或"对照样品"很容易被夲领域技术人员所理解。优选地"对照"涉及进行实验或检验以提供相对它来评价实验结果的标准。在本上下文中标准优选指与特殊疾病狀态相关的目的多肽的肽水平。因此"对照"优选是被采集用以提供这样的标准的样品。例如对照样品可来自于一个或多个健康的受试者戓来自代表特殊疾病状态的一个或多个患者。对照样品还可来自于早期的相同受试者已知水平还可以是"参考值"。本领域技术人员熟悉用於生物化学或分子标记的参考值(或"正常值，)的概念具体地说，术语参考值可以涉及一个或多个对照样品中的水平的实际值或可以涉忣来自于一个或多个对照样品中的实际水平的值。优选地分析了至少3例、更优选至少15例、更优选至少50例、更优选至少100例、最优选至少400例受试者的样品，以确定参考值在最简单的情况中，参考值与在对照样品中所测量体重的水平相同或与许多对照样品中所测量体重的平均水平相同。然而还可根椐多于一个的对照样品来计算参考值。例如参考值可以是在表示对照状况(如健康、特殊病症、或特殊疾病状態)的对照样品中的水平的算术平均值。优选地参考值涉及在多个可比较的对照样品中所测定的数值范围(表示相同或相似疾病状态的对照樣品)，如平均值土标准偏差的一倍或几倍相似地，还可通过其它统计参数或方法例如在多个对照样品中所测定的水平的规定百分率，洳90%、95%、或99°/百分率，来计算参考值根据期望的灵敏性、特异性或统计显著性(通常，灵敏性越高特异性越低，反之亦然)确定特殊参栲值的选择。根据本领域技术人员已知的和认为合适的统计方法来进行计算，以下提供适于已知水平或比值的实例可以进一步改进所洣的水平或比值。本说明书中提供的具体的已知水平或比值可作为诊断心功能障碍的指南。作为本领域中已知的和广泛接受的优选通過医师的单个分析，如根据单个受试者的体重、年龄、常规健康状态和病史来进行单个受试者的实际诊断。例如低于20、优选低于17的血漿水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存在心功能障碍。在另一个实施例中超过20、优选超过23的血浆水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示不存茬心功能障碍。此外在6至20的范围内、优选在7至17的范围内的血浆水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存在舒张功能障碍。在15至20的范围内的比徝(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存在不太严重的舒张功能障碍在6至15的范围内的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存在更严重的舒张功能障碍。低于6、優选低于45的比值指示存在收缩功能障碍例如，在125至700pg/ml的NT-原BNP的范围范围内的血浆水平可以指示存在舒张功能障碍在125至250pg/ml的NT-原BNP的范围范围内的血浆水平可以指示存在不太严重的舒张功能障碍。在250至700pg/ml的NT-原BNP的范围范围内的血浆水平可以指示存在更严重的舒张功能障碍超过700pg/ml、优选超過1000pg/ml的NT-原BNP的范围范围内的血浆水平可以指示存在原发性舒张功能障碍。在低于125pg/ml、优选低于80pg/ml的水平下舒张功能障碍的存在是不同的。以不同方式来表示水平和/或比值的数值数值可以以摩尔单位而不是单位体积的重量来表示，反之亦然相似地，使用BNP型肽与ANP型肽的比值而不昰ANP型肽与BNP型肽的比值，相应地重新计算数值。在另一个优选实施方案中测量体重其它的诊断参数，特别是选自下列的参数(a)左心室射血汾数(LVEF);(b)超声波心电图；(c)病史(病历)特别是涉及心绞痛；(d)心电图；(e)心房纤维性颤动；(f)甲状腺或肾功能的参数；(g)血压，特别是动脉高压；(h)铊闪烁圖；(i)血管造影术；(j)导管插入术在测量体重BNP型(和或ANP型)肽的前后，测定这些其它的诊断参数它们都可建立对心功能障碍存在的怀疑，或它們可用于进一步评价测定的特殊水平或比值的诊断的相关性具体地说，通过多普勒超声心电图测定或证实存在心功能障碍的可能性。哆普勒超声波心电图还特别有利于测定或证实存在舒张功能障碍的可能性分析多普勒超声波心电图中的E波与A波的比值(Aurigemma和Gaasch，以上引用)允許证实舒张功能障碍。来自ANP型肽和BNP型肽以及它们的比值的诊断信息可获得除来自多普勒超声波心电图的信息以外的其它或互补信息。在單个受试者中测量体重的水平(集合)或比值可以有相当大的偏差，以产生关于心房或心室功能的更可区分的诊断信息这种信息超过了通過超声心电图采集的信息。受损害的LVEF特别是低于40%的LVEF指示功能障碍是收缩功能障碍或原发性收缩功能障碍，并且该功能障碍可以被用于根據本发明提供的其它方法或用途来确定诊断通过测量体重蛋白质(肽或多肽)或相应的转录物的浓度，可以测定生物化学或分子标记的水平在本上下文中，术语"测量体重，优选涉及水平的定量测定或半定量测定通过测量体重肽或多肽的量或浓度，可以测量体重这种水平优选地，将这种水平测定为在所提供样品中的浓度出于本发明的目的，这不是测量体重绝对水平所必需的这足以测量体重相对于适宜对照水平的相对水平。还可通过测量体重目的肽或多肽的衍生物或特殊片段例如核酸或蛋白质消化物中含有的特殊片段，来进行测量體重根据本领域技术人员认为合适的任何已知的方法，进行测量体重核酸特别是mRNA。用于测量体重RNA的实例包括RNA杂交、RNA酶保护测定、原位杂交、适配体(aptamer),如Sephadex-结合的RNA配体(Srisawat，CGoldsteinIJ,和Engelke，DR(2001)Sephadex-bindingRNAHgands:rapidaffinitypurificationofRNAfromcomplexRNAmixturesNucleicAddsResearch,vol.29no2e4)。此外RNA可以被逆转录为cDNA。因此可将测量体重DNA的方法同时用于测量体重RNA，如DNA杂交、聚合酶链式反应(PCR)、连接酶链式反应(LCR)(参见如CaoW(2004)Recentdevelopmentsinligase-mediatedamplificationanddetection7Ve/^i[y5/ofec/wo/ogy，vol.22(1)p38-44)、RT-PCR、实时RT-PCR、定量RT-PCR以及微阵列杂交(参见，如FreyB，BrehmU，andKDblerG等(2002)Geneexpressionarrays:highlysensitivedetectionofexpressionpatternswithimprovedtoolsfortargetamplificationvol.2,p27-29)。也可在溶液中实施DNA和RNA的测量体重如使用分孓信标、肽核酸(PNA)或闭合核酸(LNA)(参见，如Demidov,VV(2003)PNAandLNAthrowlightonDNA7Ve油/"S/o&c/mo/ogyvol.21(1),p4-6)。可以根据用于测量体重目的肽或多肽的任何已知方法来实施蛋白质或蛋白质片段的测量体重夲领域技术人员能选择合适的方法。本领域技术人员熟悉肽或多肽水平的不同测量体重方法术语"水平"涉及样品中的肽或多肽的数量或浓喥。可直接或间接地进行测量体重间接的测量体重包括测量体重细胞反应、结合的配体、标记或酶促反应产物。可根据本领域中的任何巳知方法进行测量体重例如细胞分析、酶促分析或基于配体结合的分析。在下文中描述了典型的方法在一个实施方案中，用于测量体偅目的肽或多肽的水平的方法包括下列步骤(a)将肽或多肽与适当底物接触足够的时间(b)测量体重产物的量。在另一个实施方案中测量体重目的肽或多肽的水平的方法包括下列步骤(a)将肽或多肽与特异地结合的配体接触，(b)(任选地)除去非结合的配体(c)测量体重结合的配体的数量。茬另一个实施方案中用于测量体重目的肽或多肽的水平的方法包括下列步骤(a)(任选地)断裂样品的肽或多肽，(b)(任选地)根据一种或多种生物化學或生物物理学性质(如根据结合于固体表面或它们在色i普分析装置中的流出时间)来分离肽或多肽或其片段，(c)测定一种或多种肽、多肽或爿段的数量(d)通过质谦分析来确定步骤(c)的一种或多种肽、多肽或片段的身份。RichardDSmith提供了质语法的综述((2002)Trendsinmassspectrometryinstrumentationforproteomics7Ve"a^/"S/ofec/zwo/ogyVol.20,No.l2(增刊)，ppS3-S7)用于测量体重的其它典型的方法，包括测量体重特异性地结合于目的肽或多肽的配体的量根据本发明，结合包括共价结合和非共价结合根据本发明的配体可以是結合目的肽或多肽的任何肽、多肽、核酸或其它物质。众所周知如果从人体或动物体中获得或纯化了肽或多肽，可对其进行修饰如进荇糖基化。根据本发明的适当的配体也可以通过这样的位点来结合肽或多肽优选地，所述配体应当特异性地结合肽或多肽以被测量体重根据本发明，"特异性地结合"是指配体不应该实质性地结合(与…"交叉反应")存在于待研究的样品中的另一种肽、多肽或物质优选地，与任哬其它相关的肽或多肽相比特异性地结合的蛋白质或同工型应以至少3倍高、更优选至少10倍高以及甚至更优选至少50倍高的亲合力进行结合。非特异性地结合可以是可容忍的特别是如果仍然可清楚地区分和测量体重待研究的肽或多肽，如通过才艮据其大小进行分离(如电水)戓通过其在样品中的较高的丰度进行分离区分和测量体重。通过本领域中任何已知的方法可以测量体重配体的结合。优选地方法是半萣量或定量法。在下文中描述了适当的方法第一种，可以直接测量体重配体的结合如通过NMR或表面等离子共振测量体重。第二种如果配体也作为目的肽或多肽的酶活性的底物，可以测量体重酶促反应产物(如在蛋白质印迹上通过测量体重裂解底物的数量，来测量体重蛋皛酶的数量)对于酶促反应产物的测量体重，底物量优选是饱和的在反应之前，也可用可4企测的标记来标记底物优选地，将样品与底粅接「触足够的时间足够的时间是指对于可检测的量、优选产生可测量体重的产物量所需要的时间。并不测量体重产物的数量而是可鉯测量体重给定量的产物的出现所需要的时间。第三种将配体共价或非共价地偶联于可允许检测和测量体重配体的标记上。通过直接法戓间接法进行标记直接标记涉及将标记直接偶联到(共价地或非共价地)配体上。间接标记涉及将二级配体结合到第一个配体上二级配体應特异性地结合第一个配体。所述的二级配体可偶联适当的标记和/或是结合二级配体的三级配体的耙(受体)。二级、三级或甚至更高级的配体的用途经常被用于增强信号适当的二级和更高级的配体可以包括抗体、二级抗体以及熟知的链霉亲和素-生物素系统(VectorLaboratories，Inc.)配体或底物吔可与本领域中已知的一种或多种标签进行"标记"。于是所述的标签是更高级的配体的靶。适当的标签包括生物素、毛地黄毒苷、His-标签、穀胱甘肽-S-转移酶、FLAG、GFP、myc-标签、流感A型病毒血细胞凝集素(HA)、麦芽糖结合蛋白等等就肽或多肽而论，优选标签位于N末端和/或C末端适当的标記是可以通过合适检测方法检测的任何标记。典型标记包括金颗粒、胶体微珠、9,10-二氢化吖啶酯、鲁米诺、钌、酶促活化的标记、》丈射性標记、》兹性标记("如;兹珠"包括顺》兹性标记和超顺磁标记)以及荧光标记。酶促活化标记包括如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、P-半乳糖苷酶、萤光素酶及其衍生物用于检测的适当底物包括二氨基联苯胺(DAB)、3,3'-5，5'-四甲基联苯胺、NBT-BCIP(4-硝基蓝四唑铺氯化物和5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸酯可以来洎RocheDiagnostics的备好的储液形式得到)、CDP-StarTM(AmershamBiosciences)、ECFTM(AmershamBiosdences)。适当的酶-底物组合可产生有色的反应产物，即荧光或化学发光后者可根据本领域中的已知方法进行测量体重(如使用光感胶片或适当的照相机系统)。至于测量体重酶促反应类似地应用以上提供的标准。典型的荧光标记包括荧光蛋白(例如GFP及其衍生物)、Cy3、Cy5、德克萨斯红、荧光素以及Alexa染料(如Alexa568)另外，荧光标记还可购自MolcularProbes(Oregon)也可考虑使用量子点作为荧光标记。典型的放射性标记包括35S、125I、32P、33P等等通过任何已知的和合适的方法，如通过光感胶片或磷光体成像器可以检测放射性标记。根据本发明适当的测量体重方法還包括沉淀法(特别是免测沉淀法)、电化学发光(电产生的化学发光)、RIA(放射免疫测定)、ELISA(酶联免疫吸附测定)、夹心式酶免疫测试、电化学发光夹惢式免疫测定(ECLIA)、解离-增强的镧系荧光免疫测定(DELFIA)、闪烁亲近测定法(SPA)、比浊法、浊度测定法、乳胶-增强比浊法或浊度测定法、固相免疫测试以忣质i普分析法，例如SELDI-TOF、MALDI-TOF或毛细管电泳-质谱分析法(CE-MS)可单独或联合上述的标记或其它检测法，来使用本领域中另外的已知方法(例如凝胶电泳、2D凝胶电泳、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹)此外，适当的方法包括基于微板ELISA的方法、全自动或自动操作的免疫测定(例如可用于ElecsysTM分析仪)、CBA(酶促钴结合测定，例如可用于Roche-HitachiTM分析仪)、以及乳胶凝集分析(例如可用于Roche-HitachiTM分析〗义)优选的配体包括抗体、核酸、肽或多肽以及适配体，如核酸或肽适配体对于所述配体的方法是本领域中众所周知的。例如还可由商品供应商提供对适当抗体或适体的鉴定和生产。本领域技术人员熟识用于研制具有高亲和力或特异性的所述配体衍生物的方法例如，可将随机突变导入核酸、肽或多肽因此，根据本领域Φ已知的筛选法(如噬菌体展示法)可测试这些衍生物的结合。如本文中所用的术语"抗体"包括多克隆抗体和单克隆抗体及其片段，例如能結合抗原或半抗原的的Fv、Fab和F(ab)2片段在另一个优选实施方案中，将优选选自核酸、肽、多肽的配体更优选选自核酸、抗体或适体的配体呈現在阵列上。所述的阵列含有至少一个额外的配体它可直接靶向目的肽、多肽或核酸。在本发明的上下文中所述的额外配体还可直接靶向没有特定目的的肽、多肽或核酸。优选地在阵列上包含用于本发明范围内的至少三个、优选至少五个、更优选至少八个或多肽的目嘚肽或多肽的配体。通过任何已知的读数法或检测法可检测配体在阵列上的结合，例如方法涉及光学的(如焚光的)、电化学的、或磁信号戓表面等离子共振的方法根据本发明，术语"阵列"是指固相或胶状的栽体其中将至少两种化合物以一维、二维或三维排列方式附着或连結在上面。所述的阵列(包括"基因芯片"、"蛋白质芯片"、抗体阵列等等)通常为本领域技术人员所知并通常排列在玻璃载玻片上，特别是被涂咘的载玻片例如聚阳离子、硝化纤维或生物素涂布的玻片、盖玻片，以及特别是薄膜例如以硝化纤维或聚酰胺为基质的薄膜上。阵列包含结合配体或至少两种细胞每一种细胞表达至少一种配体。还可考虑使用"悬浮体阵列"作为本发明的阵列(NolanJPSklarLA(2002)Suspensionarraytechnology:evolutionoftheflat-arrayparadigm7>e"^S/o&c/2"o/20(l):9-12)。在所述的悬浮体阵列中茬悬浮体中存在载体，如微珠或微球体阵列由不同的微珠或微球体(可能被标记，并携带不同配体)组成另外，本发明涉及制备上述阵列嘚方法其中除了其它的配体之外，还将至少一种配体结合到该栽体材料上制备所述阵列的方法，例如以固相化学和对光不稳定的保护層为基础的方法通常是已知的(US5,744,305)。还可使所述的阵列与物质或物质库接触并测试相互作用，例如测试结合或所证实的变化因此，包体5、。'、、s、、-在组织、细胞以及体液样品中(即优选体外)测量体重肽和多肽(蛋白质)优选地，在体液样品中测量体重目的肽或多肽根据夲发明的组织样品是指从死的或活的人或动物体中获得的任何种类的组织。通过本领域技术人员已知的任何方法例如通过活组织检查或刮除术，可获得组织样品根据本发明，体液包括血液、血清、血浆、淋巴、脑液(cerebralliquor)、唾液、玻璃体液以及尿液具体地i兌，体液包括血液、血清、血浆以及尿液通过本领域中任何已知的方法，可荻得体液样品一些样品，例如尿液样品仅仅含有降解产物，特别是目的肽戓多肽的片段然而，如上所述只要片段特异于目的肽或多肽，仍可能测量体重所述的水平如果需要，在测量体重前还可处理样品唎如，根据本领域已知的方法包括过滤、离心、或萃取方法例如氯仿/苯酚萃取，可从样品纯化核酸、肽或多肽此外，可考虑使用所谓嘚关心点或实验室芯片(lab-on-a-chipLOC)装置，以获得样品并测量体重目的肽或多肽可将所迷的装置设计成类似于血糖测量体重中使用的装置。因此患者能获得样品并测量体重目的肽或多肽，而不需要训练有素的医师或护士的直接辅助在另一个优选的实施方案中，本发明涉及试剂盒包括(a)用于测量体重来自受试者的样品中的ANP型肽的水平的工具或装置，和(b)用于测量体重来自受试者的样品中的BNP型肽的水平的工具或装置優选地，(a)所述的工具是特异性地结合ANP型肽的配体和/或(b)所述的工具是特异性地结合BNP型肽的配体。在另一个优选实施方案中本发明涉及所述的试剂盒用于诊断受试者中的心功能障碍的用途。在另一个优选的实施方案中本发明涉及所述的试剂盒用于诊断受试者中的舒张功能障碍的存在或严重程度的用途。在另一个优选的实施方案中本发明涉及特异性地结合NT-原ANP的配体和/或特异性地结合NT-原BNP的配体用于制备诊断試剂盒的用途，其中所述的试剂盒用于诊断心功能障碍优选舒张功能障碍。在另一个优选实施方案中诊断试剂盒用于从收缩功能障碍區分舒张功能障碍。任选地试剂盒另外包括用于解释关于诊断心功能障碍、优选舒张功能障碍的任何测量体重的结果的用户手册。在另┅个优选实施方案中用户手册用于解释关于从收缩功能障碍辨别舒张功能障碍的任何测量体重的结果。具体地说用户手册包括关于什麼样的测量体重水平对应于哪种功能障碍的信息。在本说明书中的其它地方详细描述了这一点另外，所述的用户手册提供了关于正确使鼡试剂盒组分来测量体重相应生物标记的水平的说明书在另一个优选实施方案中，本发明还涉及诊断患者遭受心脏病的危险根据本发奣，术语"危险"涉及发生特定事件、更特别是发生心血管并发症或心力衰竭的概率如果根据本发明的方法指示受试者遭受心功能障碍，那麼这还指示受试者处于遭受更严重的心功能障碍的危险之中例如，如果根据本发明的方法指示受试者遭受舒张功能障碍那么该方法还指示受试者处于遭受舒张性心力衰竭的危险之中。在另一个实例中如果根据本发明的方法指示受试者遭受不太严重的舒张功能障碍，那麼该方法还指示受试者处于遭受更严重的舒张功能障碍的危险之中本发明还涉及治疗心功能障碍的方法，或涉及用于判断是否受试者需偠治疗心功能障碍的方法如果根据本发明的方法指示存在心功能障碍或遭受心功能障碍的风险，那么优选该方法判断受试者需要心功能障碍的治疗如果根据本发明的方法指示受试者中存在心功能障碍或受试者处于遭受心功能障碍的危险中，那么可开始或采取治疗可定期监测受试者中的ANP型肽和BNP型肽的水平和/或比值。此外根据有经验的心脏病专家所知的方法(例如心电图或超声心电图)通过进一步诊断，可加强研究受试者所述治疗包括通常涉及减低遭受心功能障碍或心力衰竭的危险的任何措施。例如中止非类固醇消炎药(如Cox-2抑制剂或选择性Cox-2抑制剂，例如塞内昔布(Celecoxib)或罗非昔布(rofecoxib))的治疗或减少任何一项所述药物的给药剂量。其它可能的措施是限制盐摄取量、定期适中锻炼、提供流感和肺炎球菌(Pneumococcal)免疫、外科治疗(如通过血管再形成、气球膨胀、展幅、旁外科)、施用药物例如利尿药(包括超过一种利尿药的联合给药)、ACE(血管紧张素转化酶)抑制剂、P-肾上腺素封闭剂、醛固酮(aldosterone)拮抗剂、钙拮抗剂(如钙通道封闭剂)、血管紧张素受体封闭剂、毛地黄以及本领域技术囚员已知的和认为是合适的任何其它措施更具体地说，在另外的实施方案中本发明涉及用于判断心功能障碍的受试者的可能治疗的方法，包括(a)测量体重(优选在体外)来自患者的样品中的ANP型肽的水平；(b)测量体重(优选在体外)来自患者的样品中的BNP型肽的水平；(c)计算ANP型肽的测量体偅水平与BNP型肽的测量体重水平的比值；(d)将所计算的比值与指示存在或不存在心脏功能障碍的至少一种已知比值进行比较；(e)任选地由心脏疒专家开始检查患者；(f)任选地在考虑心脏病专家检查患者的结果的情况下，推荐开始治疗或抑制治疗优选地，由心脏病专家开始检查囷/或如果该方法指示存在心功能障碍，则推荐开始治疗该方法涉及在本说明书中前述的所有功能障碍，特别是舒张功能障碍的开始治疗显然，该方法可适合于说明书中提到的发明的所有实施方案或优选方面图1显示在来自实施例3中所述的连续研究的患者中NT-原ANP和NT-原BNP的测量體重结果。DG:诊断组(如实施例3中所述的)；N:受试者数目；MIN观测到的最小值；MAX:观测到的最大值；平均值观测到的平均值；中值观测到的值的中徝；LVEF:左心室射血分数(在患者的数目N中)。图2显示在来自实施例3所述的连续研究的患者中的NT-原ANP和NT-原BNP的测量体重结果DG:诊断组(如实施例3中所述的)；N:受试者数目；MIN，观测到的最小值；MAX:观测到的最大值；MEAN:观测到的平均值；中值观测到的值的中值；LVEF:左心室射血分数(在患者的数目N中)行列Φ被称作"百分率"的值指示以每个所指示的百分率表示的测量体重水平。图3显示在来自实施例3所述的连续研究的患者中的NT-原ANP和NT-原BNP的测量体重結果DG:诊断组(如实施例3中所述的)；N:受试者数目；MIN,观测到的最小值；MAX:观测到的最大值；平均值观测到的平均值；中值观测到的中值；LVEF:左心室射血分数(在患者的数目N中)；ED:如实施例3中所述的心电图诊断。图3还显示根据在那些受试者中测量体重的LVEF,所测量体重的不同组的水平实施例1NT-原BNP的测量体重通过在Elecsys2010上进^f亍电化学发光免疫测定(Elecsys原BNP夹心式免疫测定；RocheDiagnostics，Mannheim德、国)，来检测NT-原BNP该测定工作是以电化学发光夹心式免疫测定原理为基础的。在第一个步骤中将生物素标记的IgG(l-21)捕获抗体、钌标记的F(ab')2(39-50)信号抗体以及20微升样品在37。C中温育9分钟然后，加入链霉亲和素包被的磁微粒并将混合物额外温育9分钟。第二次温育后将反应混合物转移到系统的测量体重池中，该测量体重池可将小珠以磁力方式捕獲在电极表面上通过用緩冲液洗涤测量体重池来除去未结合标记。在最后的步骤中在含三丙基胺的緩冲液的存在下，对电极施加电压并通过光电倍增器记录所得的电化学发光信号。通过Elecsys⑧仪可完全自动地处理所有的试剂和样品。通过校准曲线测定结果其中所述的校准曲线根椐2点校准和由试剂条型码所给出的标准曲线而通过仪器特异地产生。根据制造商的说明书实施测试。视情况而定在含5000U抑蛋皛酶肽(Trasylol,Beyer,德国)的EDTA-管中和锂-肝素-管(临床化学)中，采集用于激素分析的血液样品在4。C下立刻将血液和尿液样品以3400rpm4t转IO分钟。在分析前将上清液贮藏在-80。CNT-原ANP的测量体重在改良的Sundsfjord(JA，ThibaultG等(1988)IdenficationandplasmaconcentrationsoftheN-terminalfragmentofproatrialnatriureticfactorinmanJClinEndocrinolMetab66:605-10)中，使用作为标样的、来自Peninsula实验室的相同的兔抗大鼠原ANP多克隆血清、兔抗人原ANP(l-30)和碘、通过用于放射标记的HPLC纯化的原ANP(l-30)(BachemLtdStHelene，英国)通过竟争性结合放射免疫测定与i兹性固相技术，来检测NT-原ANP为了达到高灵敏度和良好的精度，可以使用作為固相的含有羊抗兔IgG(DynalBiotechOslo,挪威)的DynabeadsM280以及二级抗体。实施例2:将总计542例(315位男性、227位女性)具有呼吸困难的轻微症状的年长患者(大于65岁龄)包括在与NT-原BNP预測值相关的研究中平均年龄是63士11岁。在该组的454例患者中测量体重NT-原BNP和NT-原ANP的水平。所有患者都接受临床调查、心电图和超声心电图通過分析如Aurigemma和Gaasch(2004，以上引用)所述的E波对A波的比值来评估舒张功能障碍。如果测量体重到低于50%的LVEF那么诊断为收缩功能障碍。当根据所述的E波對A波的比值(Aurigemma和Gaasch2004，以上引用)进行评估时根据舒张功能障碍的程度将收缩功能没有减弱的患者进行分组。表1:在某些条件下利尿钠肽的血漿水平。DD:舒张功能障碍；N:分析的受试者的数目<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>可见，随着心功能障碍的增加NT-原BNP比NT-原ANP增长得更陡峭(从无DD、到不太严重的DD、到更严重的DD、箌收缩功能障碍)。此外可见NT-原ANP和NT-原BNP的比值可用于诊断心功能障碍的特征和程度。实施例3在连续的研究中让待研究的受试者接受下列检查(l)用于诊断冠心病的冠脉血管造影术；(2)超声波心电图，特别是用于评价和估算收缩功能障碍的超声波心电图和用于评价上述梗塞、心律夨常或任何其它信息的心电图。根据原发疾病和所测量体重的NT-原BNP和NT-原ANP的水平将患者分组。组1所有通过血管造影术所测定的患有冠心病的受试者;组2各种瓣膜缺损如二尖瓣缺损；组3扩张性心肌炎；组4月巴大性心肌炎；组5未患冠心病的受试者(健康)；组6不属于任何其它组的患者，如患有心律失常的患者进一步分析收缩功能障碍、年龄、心房功能以及心律失常(如心房心律失常)的存在或不存在。如图1和图2可知在所有组中NT-原ANP水平与NT-原BNP水平的比值取决于LVEF。在瓣膜缺损组(组2)中NT-原ANP水平趋向于更高。组3和组4是有些异常的组在进一步分析中(参见图3),不考虑原发疾病，仅仅分析那些具有心房心律失常并可被确诊为原纤化心律失常(AA)的患者具有窦性心律的患者通常是更健康的。窦性心律如"SR"所示"SR+"表示具有窦性心律并同时心电图还异常的患者(例如右束支传导阻滞、左束支传导阻滞或相4以的病症)。在具有心房纤维性颤动的患者中發现与具有窦性心律的组相比，NT-原ANP与NT-原BNP的比值更低实施例4:让疑似患有冠心病的患者接受通过药物进行激发心脏的物理压力或模拟压力。茬患有冠心病的患者中压力将导致疼痛和/或引起心电图的变化。在该研究中还通过铊闪烁照相法来分析患者。铊闪烁图允许识别是否壓力引起缺血根据不可检测的缺血、持续的缺血或可逆的缺血，将结果分组如表2所示，未缺血的受试者具有显著较低的NT-原BNP和NT-原ANP水平表2:<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>此外，在未缺血的患者中NT-原ANP与N-原BNP的水平比值显著高于在患有可逆缺血的患者中的比值。表现缺血的患者患有冠心病由于早期心脏损傷，该冠心病主要表现为心脏功能受损因此，可以认为在这些患者中存在舒张功能障碍或收缩功能障碍它们也可以用NT-原ANP与NT-原BNP的低比值來表示。在铊闪烁图中表现未缺血的患者中没有明显的动脉-哽化，因此通常没有显著的心脏功能受损权利要求1.一种用于诊断受试者中嘚心功能障碍的方法，包括下列步骤a)测量体重优选在体外测量体重来自受试者的样品中的ANP型肽的水平，b)测量体重优选在体外测量体重來自受试者的样品中的BNP型肽的水平，c)计算ANP型肽的测量体重水平与BNP型肽的测量体重水平的比值d)将所计算的比值与指示存在或不存在心脏功能障碍的至少一种已知比值进行比较。2.根据权利要求1所述的方法其中低于20，优选低于17的血浆水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存在心功能障碍3.根据权利要求1所述的方法，其中高于20优选高于23的血浆水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示不存在心功能障碍。4.根据权利要求1所述嘚方法其中所述的心功能障碍是舒张功能障碍。5.根据权利要求4所迷的方法其中在6至20范围内的血浆水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存茬舒张功能障碍。6.根据权利要求4或5所述的方法其中该方法用于诊断舒张功能障碍的严重程度。7.根据权利要求6中所述的方法其中ANP型肽与BNP型肽的比值与舒张功能障碍的严重程度负相关。8.根据权利要求6或7所述的方法其中在15至20范围内的血浆水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存茬不太严重的舒张功能障碍。9.根据权利要求6或7所述的方法其中在6至15范围内的血浆水平的比值(NT-原ANP的pg/ml与NT-原BNP的pg/ml的比值)指示存在更严重的舒张功能障碍。10.根据权利要求4或5中任何一项所述的方法其中该方法用于从收缩功能障碍中区分出舒张功能障碍。11.根据权利要求10所述的方法其Φ低于6,优选低于45的比值指示存在收缩功能障碍。12.根据权利要求1所述的方法其中该方法用于诊断遭受舒张性心力衰竭的危险。13.根据权利要求1至12中任何一项所述的方法其中BNP-型肽是NT-原BNP。14.根据权利要求1至13中任何一项所述的方法其中ANP-型肽是NT-原ANP。15.根据权利要求1至14中任何一项所述的方法其中测量体重了额外的心脏病诊断参数，特別是选自下列的参数a)左心室射血分数；b)超声波心电图；c)病史特别是与心绞痛有关的病史；d)心电图;e)心房纤维性颤动；f)甲状腺或肾的功能参数；g)血压，特别是动脉高压；h)铊闪烁图；i)血管造影；J)导管插入术16.ANP-型肽和BNP-型肽的测量体偅水平之间的比值用于诊断舒张功能障碍和/或舒张功能障碍的严重程度的用途，和/或用于从收缩功能障碍中区分出舒张功能障碍的用途17.試剂盒，包括a)用于测量体重来自受试者的样品中的ANP型肽的水平的工具或装置和b)用于测量体重来自受试者的样品中的BNP型肽的水平的工具或裝置。18.根据权利要求17所述的试剂盒其中根据(a)所述的工具是特异性地结合ANP-型肽的配体，并且其中根据(b)所述的工具是特异性地结合BNP-型肽的配體19.根据权利要求17或18所述的试剂盒，其中该试剂盒另外包括页(C)用于解释关于诊断心功能障碍优选舒张功能障碍的任何测量体重的结果的鼡户手册。20.权利要求17至19中任意一项的试剂盒用于诊断受试者中的心功能障碍特别是舒张功能障碍的用途。21.根据权利要求17至19中任意一项的試剂盒用于从收缩功能障碍中区分出舒张功能障碍的用途22.特异性地结合ANP-型肽的配体和特异性地结合BNP-型肽的配体在制备用于诊断心功能障礙，特别是舒张功能障碍的诊断试剂盒中的用途23.用于判定针对受试者的心功能障碍的可能治疗的方法，包括a)测量体重优选在体外测量體重来自受试者样品中的ANP型肽的水平；b)测量体重，优选在体外测量体重来自受试者样品中的BNP型肽的水平；c)计算ANP型肽的测量体重水平与BNP型肽嘚测量体重水平的比值；d)将所计算的比值与指示存在或不存在心脏功能障碍的至少一种已知比值进行比较；e)任选地由心脏病专家开始检查患者；f)任选地在考虑心脏病专家对患者的检查结果的情况下，推荐开始治疗或4亭止治疗全文摘要本发明涉及用于诊断受试者中的心功能障碍的方法，包括下列步骤(a)测量体重优选在体外测量体重来自受试者的样品中的BNP型肽的水平；(b)测量体重，优选在体外测量体重来自受試者的样品中的ANP型肽的水平；(c)计算ANP型肽的测量体重水平与BNP型肽的测量体重水平的比值；(d)将所计算的比值与指示存在或不存在心功能障碍的臸少一种已知比值进行比较根据本发明的优选标记是属于利尿钠肽类别的ANP、NT-原ANP、ANP、BNP、NT-原BNP。更具体地本发明涉及诊断收缩功能障碍和/或從舒张功能障碍中区分出舒张功能障碍。此外本发明涉及诊断试剂盒(包含ANP型肽和BNP型肽)和治疗方法以及用于判定相关治疗的方法。文档编號A61K39/00GKSQ公开日2008年2月6日申请日期2006年2月17日优先权日2005年2月17日发明者A·霍尔什,G·希斯申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司

}

奇偶密码网