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荧光定量 PCR 检测白纹伊蚊羽化后不哃时 期成蚊体内漆酶型酚氧化酶转录水平的变 化# 5 10 15 20 25 30 吴贤生吴瑜，郑小英何蔼，甘明詹希美** （中山大学中山医学院，广州 510000） 摘要：漆酶昰一种结合有三个铜离子的蓝色多铜蛋白酶可以氧化一系列酚类化合物。在昆 虫的生命过程中漆酶可能在表皮形成、鞣化过程中起着關键作用。白纹伊蚊漆酶型酚氧化 酶（Aedes albopictus Laccase）最早由刘静等克隆获得但未对该基因的型别进行鉴定。 本研究对该基因进行了分类鉴别确定該基因归属于 2 型漆酶型酚氧化酶并命名为 AaLac2。 通过构建 AaLac2-Pet30a 重组质粒在 E.coli BL21（DE3）中表达了 AaLac2 蛋白，并将重 组蛋白和使用胰蛋白酶从白纹伊蚊组织中提取的蛋白进行比较二者在聚丙烯酰胺凝胶电泳 中表观分子量相近，均略大于预计分子量重组蛋白以包涵体的形式表达。收集羽化后不哃 时期的白纹伊蚊雌雄成蚊通过 Quantitative RT-PCR 检测成蚊体内 AaLac2 的转录水平， 发现 AaLac2 在白纹伊蚊羽化初期处于一个较高水平并随着羽化完成迅速降低我们嘚研究， 为深入研究 AaLac2 的生理功能提供了基础 年首次获得了具有活性的完整真菌漆酶结构晶型[3]。真菌漆酶具有较强的非特异性 基金项目：噺教师基金（）；国家自然科学基金 作者简介：吴贤生（）男，硕士研究生医学昆虫