【摘要】：目的：通过建立猪皮膚全层缺损创面的动物模型比较骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs)在微粒皮、小皮片移植环境下能否促进创面上皮化,而加速创面愈合,及其可能机制予以探討为皮肤缺损的临床修复提供新的治疗思路和方法。
方法：滇南小耳猪2头,雌雄各一(昆明医学院实验动物中心提供,实验动物许可证号SYXK),抽取骨髓经密度梯度离心法及体外培养方法扩增、纯化BM-MSCs,培养至第3--5代留取备用每头猪脊柱两侧分别制作12个皮肤全层缺损创面,创面大小为3cm×3cm,实验組和对照组各12个,共计48个创面。实验组A：微粒皮+BM-MSCs+异体皮移植；实验组B：自体小皮片+BM-MSCs移植：实验组C:BM-MSCs+异体皮移植对照组a：微粒皮+异体皮移植；對照组b自体小皮片移植；对照组c：PBS+异体皮移植。术后7天、14天创面取材,做组织病理学检查评价组织病理等级,免疫组化染色Ki67、广谱角蛋白(CKp),real-time
结果：创面组织病理学检查发现,术后第7天、14天,实验组(A、B组)较对照组(a、b组)创面愈合的组织病理等级评分有统计学差异(P0.05),优于对照组Ki67免疫组化染色顯示,术后第7天、14天,实验组(A、B组)表皮表皮基底层层细胞增殖活性较对照组(a、b组)高。广谱角蛋白(CKp)免疫组化染色显示,术后14天,实验组单纯移植间质幹细胞组(C组)发现创面CKp染色阳性细胞real-time
PCR检测结果提示,术后第7天TGF-β1mRNA实验组(A、B、C组)较对照组(a、b、c组)表达较显著降低(P0.05)；第14天实验组较对照组表达无顯著统计学差异(P0.05)。术后第7天KGF-1mRNA实验组较对照组表达较显著升高(P0.05)；第14天实验组较对照组表达无显著统计学差异(P0.05)
结论：1、移植创面的BM-MSCs能够促进微粒皮、小皮片组织成活,促进上皮化,促进创面愈合。2、移植于创面的BM-MSCs,在创面微粒皮及小皮片组织微环境的作用下,调节细胞因子TGF-β1、KGF-1等的分泌,从而参与创面调控加速表皮细胞增殖有关3、BM-MSCs根据创面修复的需要,可能分化成为表皮细胞等,参与创面修复。
【学位授予单位】：昆明医學院
【学位授予年份】：2011
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