我的意思是癌脑组织pcr的△ct=癌脑組织pcr靶基因ct - 癌脑组织pcr内参ct |
最近在做q-pcr检查某基因的表达按照基因的表达中位值将标本分为高表达组和低表达组。我的理解无论是正态分布还是非正态分布的数值用中位值将癌脑组织pcr标本分成高表达组和低表达组,两组标本量相等或者相差一个才对可以看了很多文献,分出来的结果各有不同到底哪种正确?请师哥师姐指点!! 这篇文章用miR-129相对表达量的中位值为临界点分成了52和66. 这篇文章用Pim-3相对表达量的均值为临界点,分成了75和85. (这个应该是正确)、 这篇文章鼡分别用脑组织pcr和血浆中miR-128相对表达量的中位值为临界点将脑组织pcr分成了68和60、血浆分成65和63. 到底怎么分高表达、低表达是正确的,用中位值將标本分成高表达组和低表达组两组标本量相等或者相差一个才对呀?想不通到底哪里有问题 |
加入模板和引物就可以由于
灵敏度高,所以每个样品至少
个平行孔以防在后面的数据分析中,由于
无法进行统计分析通常来讲,反应体系的引
的表达丰度进行调整当然这些都是经
验值,在操作过程中还需要根据所用
,模板和引物的不同进行优
化达到一个最佳反应体系。在反应体
系配置过程中有下面几点需要注意:
不要反复冻融,如果经常使用最好溶解后放在
进行,减少加样误差最好能在冰上操作。
每管或每孔都要换新槍头!不要连续用同一个枪头加样!
光值就可以参比染料的作用是标准化荧光定量
加样误差或者是孔与孔之间的误差,
里如果反应曲線良好或已经
优化好反应体系,也可以不加