如何检测CD4+和CD8+T细胞的数量和cd4 cd8比例倒置

艾滋病患者为何要检测CD4、CD8?
核心提示:在T淋巴细胞分类中,CD4代表T辅助细胞而CD8代表T抑制细胞和T杀伤细胞。CD4+T淋巴细胞是HIV感染的主要靶细胞,而其本身又是免疫反应的中心细胞;CD8+T淋巴细胞是免疫反应的效应细胞。
  在T淋巴细胞分类中,CD4代表T辅助细胞而CD8代表T抑制细胞和T杀伤细胞。CD4+T淋巴细胞是的主要靶细胞,而其本身又是免疫反应的中心细胞;CD8+T淋巴细胞是免疫反应的效应细胞。正常人的CD4+T淋巴细胞约占总的T淋巴细胞的65%,CD8+T淋巴细胞约占35%。人体感染了HIV后,涉及的主要病理过程就是免疫系统的损害,主要表现为:CD4+T淋巴细胞的丢失,绝对数量的减少,同时CD8+T量增加,CD4和CD8的比例失调。因此CD4+,CD4+T淋巴细胞记数作为直接测定免疫功能的方法,是提供HIV感染病人免疫系统损害状况最明确的指标。
(实习编辑:吴春丽)
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【求助】CD3+T细胞是不是除了CD4+,就是CD8+?
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这个帖子发布于3年零130天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我想知道,是不是所有T细胞都是CD3+标志的?在所有CD3+的T细胞中,如果用流式细胞仪检测,圈出CD4+的一群细胞,剩下的CD4-的细胞是不是全部都是CD8+?谢谢!
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CD45表达于所有白细胞;CD3表达于T淋巴细胞;CD4表达于T辅助/诱导淋巴细胞(CD4+T细胞)和单核细胞;CD8表达于细胞毒T细胞(CD8+T)和NK细胞;CD19表达于B淋巴细胞;CD16表达于NK细胞、单核巨噬细胞、粒细胞和树突状细等;CD56表达于NK细胞和细胞毒T细胞。CD4、CD8、CD16和CD56单抗均不能特异性标记淋巴细胞某一亚群。采用CD45和(或)CD3作为设门抗体,同时兼做质控试剂。CD3阳性T细胞标记为CD3+,CD4ˉT细胞标记为CD3+ CD4ˉ ,CD8ˉT细胞标记为CD3+ CD8ˉ,B细胞标记为CD3ˉCD19+,NK细胞标记为CD3ˉCD56+或CD3ˉCD16+CD56+。
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外周血中的T细胞都是CD3+, 用流式检测,还有很少的CD4+CD8+双阳[
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alishang edited on
那小鼠脾脏的淋巴细胞呢?我是想用流式圈出了CD4+的,分析了里面细胞亚群的比例;还想分析CD4-的那群细胞,但没用CD8+的抗体来标记,可不可以直接把CD4-的那群细胞说成是CD8+的呢?谢谢!
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一般情况下,除了胸腺外,都可以这样做。所有T细胞都是CD3阳性的,其中CD4阴性的就是CD8 T细胞。胸腺内有很多双阳性的。
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非常感谢!这个信息对我帮助极大!另求详细介绍人、鼠记忆T细胞表面标记物的文献!谢谢!
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catherine5229 那小鼠脾脏的淋巴细胞呢?我是想用流式圈出了CD4+的,分析了里面细胞亚群的比例;还想分析CD4-的那群细胞,但没用CD8+的抗体来标记,可不可以直接把CD4-的那群细胞说成是CD8+的呢?谢谢!小鼠啊, 不可以!你得非常谨慎!你只能说是CD3+CD4-CD3+的除了CD4+和CD8+, 还有CD3+CD4-CD8-呢。CD3+CD4-CD8-里又可能含有gammadelta T, NKT或者其他非常规T细胞。
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catherine5229 非常感谢!这个信息对我帮助极大!另求详细介绍人、鼠记忆T细胞表面标记物的文献!谢谢!http://jvi.asm.org/content/78/11/5535.full.pdf+html人的加上 CD45RA, CD45RO
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多谢版主,这篇文章我看过,按照这个图,效应T细胞和记忆T细胞的标志是一样的,没办法分开,我现在做小鼠的,别人推荐用CD44highCD62L-,但是看这个图,效应T细胞和记忆T细胞都是这样的标记,没办法把效应T细胞和记忆T细胞分开啊?
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上图看看,你可能没完全看懂,你用的marker是effector T cell, 0cd44hicd62lhi就可以是memory了
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谢谢楼上,根据上图,效应型记忆T细胞也是CD44hiCD62lLlow的,同效应T细胞一样,您说的CD44HighCD62LHigh是中心型记忆T细胞的标志。所以,效应型T细胞和效应型记忆T细胞还是无法区分。另外,研究记忆T细胞在疾病中的作用时,很少有人研究中心型记忆T细胞,多数都是研究效应型记忆T细胞。所以,这个问题很头疼!另外还有个问题请教,用小鼠脾脏分离出的单个核细胞悬液直接上流式测CD4+的T细胞中,会有很大比例的CD44lowCD62Lhigh的初始T细胞,而CD44lowCD62Llow的细胞几乎没有;但最近做小鼠脾脏淋巴细胞体外培养,体外培养后,刺激活化,再上流式,圈出CD3+CD4+的T细胞,发现绝大多数细胞都变成了CD44lowCD62Llow的,不理解,这样标志的细胞是什么细胞呢?也不符合初始T细胞,也不符合效应T细胞。上图中也没有细胞是CD44lowCD62Llow的标志的,请高手指点!!!
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catherine5229 谢谢楼上,根据上图,效应型记忆T细胞也是CD44hiCD62lLlow的,同效应T细胞一样,您说的CD44HighCD62LHigh是中心型记忆T细胞的标志。所以,效应型T细胞和效应型记忆T细胞还是无法区分。另外,研究记忆T细胞在疾病中的作用时,很少有人研究中心型记忆T细胞,多数都是研究效应型记忆T细胞。所以,这个问题很头疼!另外还有个问题请教,用小鼠脾脏分离出的单个核细胞悬液直接上流式测CD4+的T细胞中,会有很大比例的CD44lowCD62Lhigh的初始T细胞,而CD44lowCD62Llow的细胞几乎没有;但最近做小鼠脾脏淋巴细胞体外培养,体外培养后,刺激活化,再上流式,圈出CD3+CD4+的T细胞,发现绝大多数细胞都变成了CD44lowCD62Llow的,不理解,这样标志的细胞是什么细胞呢?也不符合初始T细胞,也不符合效应T细胞。上图中也没有细胞是CD44lowCD62Llow的标志的,请高手指点!!!明白你的意思了,其实 effector T cell 和 effector memory T cell 是无法区分的,effector memory T cell 只是effector T cell 分化成 central memory T cells的一个过渡或者说是具有分化成central memory T cell潜力的effector T cells. 通常文献上或者i称为Teffl 或者i称为
Tem,都可见到。从数量上来说, effector T cell 要比 effector memory T cell 多,所以个人认为i称为 effector T cell更合适。后一个问题,可能是你的刺激或长时间体外培养导致CD62L下调,此时恐怕不能在用那些标志来定义了
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非常感谢版主。关于小鼠脾脏细胞体外培养的问题,如果是体外培养导致表面标记物下调,那这群细胞还算是效应细胞吗?如果将这群细胞体外培养后检测细胞相关指标,能说是效应细胞的功能变化吗?非常感谢!
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请教一下楼上两位高手,能不能对如何分选小鼠脾脏中的CD8+CD62L-CCR7-T细胞提点建议呢,非常感谢!
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CD45表达于所有白细胞;CD3表达于T淋巴细胞;CD4表达于T辅助/诱导淋巴细胞(CD4+T细胞)和单核细胞;CD8表达于细胞毒T细胞(CD8+T)和NK细胞;CD19表达于B淋巴细胞;CD16表达于NK细胞、单核巨噬细胞、粒细胞和树突状细等;CD56表达于NK细胞和细胞毒T细胞。CD4、CD8、CD16和CD56单抗均不能特异性标记淋巴细胞某一亚群。采用CD45和(或)CD3作为设门抗体,同时兼做质控试剂。CD3阳性T细胞标记为CD3+,CD4ˉT细胞标记为CD3+ CD4ˉ ,CD8ˉT细胞标记为CD3+ CD8ˉ,B细胞标记为CD3ˉCD19+,NK细胞标记为CD3ˉCD56+或CD3ˉCD16+CD56+。
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catherine5229 那小鼠脾脏的淋巴细胞呢?我是想用流式圈出了CD4+的,分析了里面细胞亚群的比例;还想分析CD4-的那群细胞,但没用CD8+的抗体来标记,可不可以直接把CD4-的那群细胞说成是CD8+的呢?谢谢!这有点欠缺严谨,因为理论上所有的T细胞均应该表达CD3是没有错得,但T细胞的TCR分TCRαβ+ T cell和TCRγd T cell,而后者是CD3+CD4-CD8-,此外还有NKT细胞也是CD4-CD8-的细胞
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关于丁香园不能依据CD4来判断艾滋病|CD4+T淋巴细胞的化验单怎么看
CD4+T淋巴细胞的化验单怎么看
CD4+T淋巴细胞的数量是检测艾滋病的一个标准,那么,CD4+T淋巴细胞的化验单要怎么看呢?
CD4+T淋巴细胞的化验单怎么看
&  CD4+T淋巴细胞的化验单分为6项指标,分别为  1.CD3+T淋巴细胞计数;  2.CD3+T淋巴细胞百分数;  3.CD4+T淋巴细胞计数;  4.CD4+T淋巴细胞百分数;  5.CD8+T淋巴细胞计数;  6.CD8+T淋巴细胞百分数;  其中最重要的是第3项,CD4+T淋巴细胞计数《200个/&l,进入期,需要抗病毒治疗,  第4项,CD4+T淋巴细胞百分数;也很重要,从前WHO甚至定义CD4+T淋巴细胞百分数《14%也算进入艾滋病期,3和4项通常说明的是一个问题。  机体感染HIV,CD4+T淋巴细胞首先急剧下降,然后会慢慢的恢复到正常水平,然后在8-10年内降到200个/&l,CD4+T淋巴细胞在免疫系统中发挥中枢作用。  第5项CD8+T淋巴细胞计数也发挥着重要的作用,从前这种作用被低估了,CD8+T淋巴细胞介导细胞免疫,细胞免疫在病毒感染的免疫反应中发挥的至关重要的作用,中,最后一个下降的指标就是CD8+T淋巴细胞,是坚持到最后的守望者,实际工作中发现,有的病例CD4+T淋巴细胞计数《10个/&l,CD8+T淋巴细胞计数在300个/&l,该病例仍然存活,足以说明CD8+T淋巴细胞的作用。  总之,CD4+T淋巴细胞计数《200个/&l该治疗了,CD8+T淋巴细胞计数也发挥着重要的作用,为了了解抗病毒治疗的效果应该定期检测CD4+T淋巴细胞。如果CD4+T淋巴细胞计数《50个/&l,应该刻不容缓的开始治疗。  还有化验单上CD4+T淋巴细胞的正常值是参考BD公司的文献,所检测的是欧美人的指标,国人的正常值要比这个低。
艾滋病cd4是什么意思
&  CD4+T 淋巴细胞是人体免疫系统中一种重要的免疫细胞,简称为CD4细胞。由于HIv 的攻击对象正是人体的CD4细胞,因此CD4记数能够直接反应人体免疫功能,是提供HIV 感染患者免疫系统损害状况最明确的指标。正常成人的CD 4细胞为每立方毫米500一1600 个,艾滋病病毒感染者的CD4细胞可能会出现进行性或不规则性下降,提示感染者的免疫系统受到了严重损害,当CD4细胞小于每立方毫米200 个时,就可能会发生多种严重性机会性感染或肿瘤。 目前检测CD4细胞数的标准方法是使用流式细胞仪。季节、昼夜差、某些并发症和皮质醉类药物等可能会影响CD4细胞数,但性别、成人年龄、紧张、生理性应激和妊娠则对CD4的细胞数影响不大。此外,由于CD4百分率受各种变异因素的影响较绝对数受影响程度小,因此对于临床来说,6 岁以上儿童的测定采用CD4细胞百分率比绝对数表示更有意义。
不能依据CD4来判断艾滋病
  CD4检测是艾滋病检测的一种方法,能够有指导临床治疗的作用,很多人习惯把CD4数量低看做是艾滋病感染,其实这是错误的,CD4检测结果不能作为艾滋病诊断依据,艾滋病诊断只有通过抗体检测才能判断。  给大家简单的解释一下,(PCR病毒载量检测)实际上我们真正做检测的时候,决定不是把一毫升的血全放在里面检测,真正取的只有一毫升里面特别少的一部分,所以说有一个检测的下限的问题,再少了,浓度再小的时候,有可能取的那一点点血液里就没有取到病毒,所以有一个检测限的问题。最后还要讲一个检测的项目,就是CD4细胞数量检测。  严格说来,CD4检测结果是不能作为判断是不是HIV感染的指标,在机体免疫功能明显低下的时候,CD4会很低,但是并不表示有HIV感染,因为其他原因也有可能导致机体免疫力低下,比如说先天性,一些后天的,因为药物和其他的原因导致的免疫力地下,比如说、肾移植,这些病人术后也有可能会用免疫制剂,这是为了对抗机体的排异反应,要避免这种排异,因为这个东西对你是有用的,所以要对抗排异,这时得用免疫抑制剂,这时病人体内的免疫力也是比较低的,CD4可以通过这种方法检测出来。  但是不能反过来说,不能认为CD4低就是艾滋病,因为艾滋病引起免疫力低下也很常见的,有很多人往往认为,就钻牛角尖了,艾滋病很可能是最常见的,或者说他所知道的是唯一的能够引起免疫力低下的疾病,他不知道别的疾病,只知道艾滋病,他就查CD4,一查CD4很低,就开始担心。甚至有的人CD4很高,但是他依然担心,这都没道理了。  CD4只是作为一个很间接的指标,尤其是对于医生来判断病人感染艾滋病病毒过后处于什么样的阶段,什么时候开始用药,以及判断用药后治疗的效果,这时检测CD4才是有意义的,其他时候检测CD4意义都不大。  CD4量低可能是由于其他疾病所致,虽然艾滋病毒可以引起CD4淋巴细胞数量减少,但是并不是唯一的,其他疾病,或者服用免疫抑制剂都有可能造成这种结果。CD4检测结果不能作为艾滋病诊断依据,同时CD4与CD8比值倒置也不能判断艾滋病。
艾滋病潜伏期CD4淋巴细胞的变化
&  我们都知道,艾滋病有好几年的潜伏期,在艾滋病潜伏期内尽管表面平静,其实HIV病毒对人体的CD4+T淋巴细胞一直没有停止破坏,CD4淋巴细胞也在缓慢下降,那么艾滋病潜伏期内CD4淋巴细胞的下降速度是怎样的?  艾滋病潜伏期内CD4淋巴细胞的下降速度:的人体内,每立方毫米血液中约有有800~1000个免疫细胞,当然会有差异,比如人种和免疫力不同的人群。而在艾滋病感染者感染者体内,急性感染期会损失半数的免疫细胞,HIV抗体出现后有所回升,此后感染者体内的免疫细胞则以每年50~70个每立方毫米血液的速度逐渐下降,一般情况下,当免疫细胞减少到在每立方毫米血液中只有200个左右时,下降速度就会加快,也有少数人CD4细胞300个以上也会突然加快速度下降,因此要每半年就检测CD4淋巴细胞计数,以指导治疗和评价治疗效果。  艾滋病潜伏期内CD4淋巴细胞下降的原因:HIV病毒每天摧毁大量的免疫细胞,而骨髓则通过加速生成新的免疫细胞来加以补偿,但是,新的免疫细胞的补偿速度总是赶不上免疫细胞损失的速度,这是艾滋病潜伏期内CD4淋巴细胞下降的原因,也是AIDS发展的规律。当然CD4淋巴细胞数量的减少与很多外因也有关系,比如结核菌感染、丙肝病毒感染、感染等其他感染,或者艾滋病感染者的情绪等都会影响艾滋病潜伏期CD4淋巴细胞的下降速度。
艾滋病 CD4多少才算正常
&  成人的CD4细胞为每毫升500~1600个,艾滋病病毒感染者的CD4细胞可能会出现进行性或不规则性下降,提示感染者的免疫系统受到了严重损害,当CD4细胞小于每立方毫米200个时就可能会发生多种严重性机会性感染或肿瘤。目前最新规定hiv感染者的CD4记数水平低于350个就可以开始治疗。  CD4+细胞的功能(以其对特异性刺激的增殖反应测定)在细胞数目下降前减弱,或许与DC功能相关。CD4+细胞最早的异常是对记忆抗原反应减弱,其后出现同种抗原刺激的增殖减少,最后对外源凝集素的反应缺失(如植物血凝素)。表现出三种反应均下降的感染者比那些具有全部或部分免疫功能的人更快发展到艾滋病。多数研究中,HIV感染者的HIV特异CD4+T细胞增殖反应低,但急性感染早期进行抗病毒治疗可能维持CD4+T细胞的增殖活性,这一活性可能对延缓疾病进展很重要。基于细胞培养研究的结果,一些研究者相信CD45 RO+记忆性CD4+T细胞的优先感染导致了免疫功能的紊乱。CD45RO+细胞的感染通常主要是R5病毒感染所致。需要注意的是,似乎病毒进入CD45 RA+原态细胞和CD45RO+CD4+记忆细胞是相同的,但病毒复制主要发生在CD45RO+细胞,且此类记忆细胞对HIV的细胞毒效应更敏感。重要的是原态T细胞随时间而减少,可能是IL-7能使CD4+T细胞对HIV的敏感性增加。不论是宿主体内选择感染的存在和这种选择性感染与免疫系统紊乱的关系,还是原态T细胞成为记忆CD4+细胞,都仍需深入研究。体内CD4+CD45RO细胞中可检测到HIV。HIV对CD4+T细胞的其他效应 HIV复制的其他直接效应,除细胞破坏外,可能会促进CD4+细胞数量减少和功能的下降。例如,HIV感染T细胞克隆导致细胞因子产生异常。并且,尽管不能在大量CD4+细胞(尤其是无症状感染者)中检测到HIV-1复制,HIV可能以一种潜伏或沉默状态存在,从而影响这些细胞的功能、长期存活及发育。这种隐蔽的细胞感染状态已用原位DNA和RNA PCR技术证实。因此,即使没有高水平复制,HIV也可能改变细胞因子的产生和CD4+细胞膜的完整性,从而影响细胞增殖等正常功能,并增加细胞对特定细胞因素(细胞因子)毒性效应的敏感性。HIV对CD4+细胞功能的影响,及其他效应
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肺癌患者IL-17~+CD4~+T细胞和IL-17~+CD8~+T细胞表达的初步研究
【摘要】:目的
通过检测肺癌患者外周血中IL-17+CD4+T(Th17)细胞和IL-17+CD8+T(Tc17)细胞的比例,分析Th17细胞和Tc17细胞表达的相关性以及二者的表达与临床生物学特征的关系,以探讨二者在肺癌免疫中的作用及检测的临床意义。
应用流式细胞术细胞内标记染色法分别检测60例肺癌患者PBMCs(Peripheral blood mononuclear cells,外周血单个核细胞)中Th17细胞和Tcl7细胞占CD3+T细胞的比例,并以40例体检健康者作为对照。对数据进行整理,并采用SPSS13.0软件进行统计学分析。
1.肺癌患者PBMCs中Th17细胞(1.795±0.623)%的表达显著高于对照组(1.405±0.256)%,(t=28.944,P0.001)。肺癌患者PBMCs中Tc17细胞占CD3+T细胞的比例为(0.865±0.357)%,与健康对照组(0.640±0.204)%相比明显升高,差异有统计学意义(t=14.051,P0.001)。
2.肺癌患者PBMCs中Tc17细胞与Th17细胞的表达呈线性正相关(r=0.770,P0.05);并且在健康人PBMCs中两者的比例也呈正直线相关(r=0.532,P0.05)。
3.Th17细胞在不同病理类型患者PBMCs中的比例无统计学差异(F=1.562,P=0.219),其中鳞癌患者Th17细胞的比例为(1.589±0.720)%、腺癌为(1.844±0.584)%、小细胞癌为(1.941±0.540)%。Tc17细胞在鳞癌(0.878±0.396)%、腺癌(0.824±0.367)%和小细胞癌(0.912±0.312)%PBMCs中的表达无统计学差异(F=0.314,P=0.732)。同时,肺癌组Th17细胞和Tc17细胞的表达与年龄、性别和吸烟状况无关(P均0.05)。
4.在Ⅰ-ⅢA期、ⅢB期和Ⅳ期肺癌患者外周血中Th17细胞的表达分别为(1.494±0.699)%、(1.725±0.474)%和(2.046±0.560)%,差别有统计学意义(F=4.882,P=0.011);其中,Th17细胞在Ⅳ期的表达显著高于Ⅰ~ⅢA期(P0.05)。Tc17细胞在Ⅰ~ⅢA期(0.683±0.391)%、ⅢB期(0.931±0.289)%和Ⅳ期(0.959±0.336)%的表达有统计学差异(F=3.633,P=0.033),其中ⅢIB期和Ⅳ期Tcl7细胞的比例明显高于Ⅰ~ⅢA期(P均0.05)。
1.肺癌患者Th17细胞和Tc17细胞的表达升高且与临床分期有关,提示二者可能是促进肺癌形成与疾病进展的重要免疫因素之一。
2.外周血中Th17细胞和Tc17细胞的比例呈正直线相关关系,提示二者可能在肺癌免疫中发挥协同作用。
3.检测Tc17细胞和Th17细胞的表达情况可作为评价肺癌患者免疫状态的新指标并为疾病的监测提供参考。
【关键词】:
【学位授予单位】:山西医科大学【学位级别】:硕士【学位授予年份】:2013【分类号】:R734.2【目录】:
中文摘要5-7Abstract7-9前言9-12材料与方法12-16 1. 研究对象12-13 2. 主要仪器和试剂13-14 3. 实验方法14-15 4. 统计学处理15-16结果16-21 1. Th17和Tc17细胞的检测结果16 2. Th17与Tc17细胞表达的关系16-18 3. Th17和Tc17细胞在不同性别、年龄和吸烟状况之间表达的情况18 4. 不同病理类型Th17和Tc17细胞表达的情况18-19 5. 肺癌组不同TNM分期Th17和Tc17细胞表达的情况19-21讨论21-27结论27-28参考文献28-32综述32-44 参考文献40-44附录44-47攻读学位期间发表论文情况47-48致谢48-49个人简历49
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