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左卡尼汀口服溶液中的药物含量测定及光学异构体检查
来源:《中外健康文摘》2013年第26期供稿文/卿咏梅
[导读]HPLC法可快速、有效地分别检测左卡尼汀口服溶液中药物含量和光学异构体。
沙延淳 邓波 石莉（通讯作者） 杨红玉 杨祝仁 叶小辉（辽宁省药物研究院 辽宁沈阳 110015）
【摘要】& 目的& 建立了高效液相色谱法测定左卡尼汀口服溶液中左卡尼汀含量，并建立了高效液相色谱法测定左卡尼汀口服溶液中左卡尼汀光学异构体。方法 采用Kromasil C18色谱柱（200mm&4.6mm，5&m）；流动相为磷酸盐缓冲液[取磷酸11.5ml，加水稀释至1900ml，用氢氧化钠溶液（1.0 ml/L）调节pH2.4，加庚烷磺酸钠1.1g，振摇使溶解]-甲醇（900：100）；流速为1ml/min；检测波长为225nm。结果 试验条件下，进样量在19.9&g～59.7&g范围内线性关系良好（r=0.9998），平均回收率99.34%，精密度RSD为0.81%(n=6)，三批左卡尼汀含量分别为99.81%、98.31%和99.65%。未检出光学异构体。结论 HPLC法可快速、有效地分别检测左卡尼汀口服溶液中药物含量和光学异构体。
【关键词】 左卡尼汀& 口服溶液& 高效液相色谱法& 含量测定& 光学异构体
&&&&&&& 卡尼汀（Carnitine）是1905年有两位俄国科学家在肌肉提取物中首次发现的[1]，有左旋和右旋两种存在形式，只有左旋物才有生物活性。左卡尼汀（Levocarnitine）又名左旋肉碱，化学名为L-3-羟基-4-氮-三甲氨基丁酸，是一种广泛存在于机体组织内的特殊氨基酸，为脂肪代谢所必需。左卡尼汀口服溶液，临床上用于治疗原发和继发左卡尼汀缺乏。休克及急慢性心功能不全、缺血性心肌病、心肌心律失常、心绞痛、心肌梗死；急慢性肝炎，肝硬化，慢性肝功能不全的辅助治疗；缺血性脑血管疾病；肌肉萎缩；糖尿病；慢性尿毒症尤其是长期透析的患者；全肠外营养和创伤。也可用于减少抗肿瘤药物对心脏毒性和减少丙戊酸的毒性(REYE&LIKE综合征)；新生儿营养不良，产后子宫收缩不良的辅助治疗。
&&&&&&& 本实验采用高效液相色谱法，分别对左卡尼汀口服溶液进行含量测定和光学异构体检查。
&&&&&&& Fig. 1& Structure of Levocarnitine
&&&&&&& 图 1& 左卡尼汀化学结构式
&&&&&&& 1& 仪器与材料
&&&&&&& 日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10AV检测器，N2000色谱工作站； Kromasil C18色谱柱200mm&4.6mm，5&m（北京迪马公司）；BP211D电子天平（赛多利斯）。
&&&&&&& 左卡尼汀（东北制药集团股份有限公司，纯度质量分数&99%），甲醇（色谱纯，天津康科德试剂有限公司；批号：），纯化水（自制），磷酸、庚烷磺酸钠、三乙胺和冰醋酸均为分析纯。
&&&&&&& 2& 方法与结果
&&&&&&& 2.1& 左卡尼汀口服溶液的制备
&&&&&&& 将处方量的左卡尼汀、L-酒石酸、甜菊糖甙（质量比200:8:1）分别加水溶解，混合，加水近全量时加入适量5%羟苯乙酯醇溶液和柠檬香精，加水至全量，滤过，分装，湿热灭菌，即得。
&&&&&&& 2.2& 左卡尼汀口服溶液外观性状和pH值检查
&&&&&&& 按&2.1&项下方法制备的左卡尼汀口服溶液为无色的澄明液体；微香，味甜。
取本品三批各5支，依法测定（中国药典2010年版二部附录IV H），pH测定结果见表1。
&&&&&&& Table 1& The value of pH
&&&&&&& 表1&& pH值测定结果
&&&&&&& 2.3& 左卡尼汀口服溶液含量测定
&&&&&&& 2.3.1& 色谱条件
&&&&&&& 色谱柱：Kromasil C18色谱柱200mm&4.6mm，5&m（北京迪马公司）；流动相：磷酸盐缓冲液[取磷酸11.5ml，加水稀释至1900ml，用氢氧化钠溶液（1.0ml/L）调节pH2.4，加庚烷磺酸钠1.1g,振摇使溶解]-甲醇（900：100）；流速：1ml/min；检测波长：225nm。
&&&&&&& 2.3.2& 空白试验
&&&&&&& 精密量取本品空白（辅料）溶液2ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，精密量取20ul,注入色谱仪，试验表明空白（辅料）溶液对本品含量测定无干扰。
&&&&&&& 2.3.3& 检测限和定量限
&&&&&&& 逐级稀释含量测定项下对照品溶液，测定样品峰的峰高，同时测定相同条件下的色谱基线噪声，取基线噪声的3倍值作为最低检测限，求得本品的最低检测限为0.04&g；取基线噪声的10倍值作为定量限，求得本品的定量限为0.1&g。
&&&&&&& 2.3.4& 线性关系考察
&&&&&&& 精密称取左卡尼汀对照品19.90mg，置5ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含3.98mg的溶液。分别精密吸取5、7.5、10、12.5、15&l，注入液相色谱仪中，测定色谱峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y=4，相关系数为0.9998。结果表明，左卡尼汀进样量在19.9&g～59.7&g范围内线性关系良好。
&&&&&&& 2.3.5& 精密度试验
&&&&&&& 精密量取本品，按含量测定项下方法制备供试品溶液。分别精密吸取20&l，连续进样6次，按前述色谱条件进样分析测定，计算精密度为0.81%，结果表明该方法精密度良好。
&&&&&&& 2.3.6& 稳定性试验
&&&&&&& 精密量取本品，按含量测定项下制备供试品溶液，精密量取同一供试品溶液批号（01），按0、2、4、6、8小时时间间隔，分别进样20&l，测定色谱峰面积，以峰面积计算RSD，结果为0.35%，表明本品溶液室温放置12h内稳定。
&&&&&&& 2.3.7& 重复性试验
&&&&&&& 精密量取五份样品，分别按含量测定项下方法测定计算左卡尼汀含量RSD为0.39%。
&&&&&&& 2.3.8& 回收率试验
&&&&&&& 精密称取左卡尼汀原料80mg、100mg、120mg，置50ml量瓶中，分别加入空白辅料（处方量）溶液各1ml，加水稀释至刻度，分别配制制成相当于左卡尼汀含量测定浓度的80%、100%、120%的溶液各三份，计算回收率，结果见表2。
&&&&&&& Table 2& Recovery of Levocarnitine
&&&&&&& 表2&& 左卡尼汀回收率试验测定结果
&&&&&&& 2.3.9& 含量测定
&&&&&&& 对照品溶液的制备：精密称取左卡尼汀对照品适量，加水溶解，制成2mg/ml的溶液，作为对照品溶液。
&&&&&&& 供试品溶液的制备：因含量测定与有关物质的色谱条件及测定方法完全一致，故取有关物质项下的供试品溶液，作为含量测定供试品溶液。
&&&&&&& 测定法：精密量取对照品溶液和供试品溶液各20&l分别注入液相色谱仪，测定供试品的含量，记录色谱图，按外标法计算含量。测定结果见表3。
&&&&&&& Table 3& Determination of Levocarnitine
&&&&&&& 表3& 左卡尼汀含量测定结果
&&&&&&& 根据上述测定结果，本品含左卡尼汀的标示量在90.0%-110.0%之间。
&&&&&&& 2.4& 左卡尼汀口服溶液光学异构体检查
&&&&&&& 2.4.1& 色谱条件
&&&&&&& 色谱柱：手性色谱柱；流动相：三乙胺溶液（量取三乙胺1.5ml，于 950m水中，用5%冰乙酸调pH值为6.0，用水定容至1000ml，即得。）：乙腈=20：80；流速：1.0ml/min；波长：210nm。
&&&&&&& 2.4.2& 系统适用性试验
&&&&&&& 称取右旋卡尼汀对照品10.9mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20&l注入液相色谱仪，记录色谱图。称取左卡尼汀对照品8.6mg，置10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20&l注入液相色谱仪，记录色谱图。分别称取左卡尼汀对照品10.9mg，右旋卡尼汀对照品9.4mg，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20&l注入液相色谱仪，记录色谱图，按右旋卡尼汀峰计算，理论板数为4359，右旋卡尼汀峰与左卡尼汀峰的分离度为1.296。
&&&&&&& 2.4.3 检测限&&
&&&&&&& 取系统适用性试验项下右旋卡尼汀对照品溶液，逐级稀释，取20&l注入液相色谱仪。按信噪比(S/N)为3作为检测下限，最低检出浓度为0.03mg/ml。
&&&&&&& 2.4.4 对照溶液的稳定性试验&&
&&&&&&& 取右旋卡尼汀对照品约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，室温下放置，于0、2、4、6、8h分别测定，以峰面积计算RSD，结果为0.85%，表明本品溶液室温放置8h内稳定。
&&&&&&& 2.4.5 光学异构体检查&&
&&&&&&& 对照溶液的制备& 取右旋卡尼汀对照品约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
&&&&&&& 供试溶液的制备& 精密量取本品1.0ml，置5ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试溶液。
&&&&&&& 测定法& 分别精密吸取对照溶液与供试溶液各20&l，注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算。测定三批样品的右旋卡尼汀。
&&&&&&& Table 4& The test of optical isomer
&&&&&&& 表4& 样品光学异构体检查结果
&&&&&&& 3& 讨论与结论
&&&&&&& 分别配制2mg/ml的左卡尼汀对照品溶液、左卡尼汀原料溶液，在200-400nm范围内进行紫外扫描，其最大吸收波长为末端吸收，参考文献[2]，本方法选择225nm为左卡尼汀含量测定的吸收波长。
&&&&&&& 由于卡尼汀只有左旋物才有生物活性，而其右旋异构体对肉碱乙酰转移酶（CAT）和肉碱脂肪酰转移酶（PTC）有竞争性抑制作用[3]。考虑到左卡尼汀口服溶液的用药安全与药品质量控制，本研究建立了高效液相色谱法对光学异构体进行检查。而目前其他文献中，多采用柱前衍生化HPLC法[4]进行检测，方法复杂，而且需要荧光检测器，对设备要求较高。另有文献采用手性色谱柱测定左卡尼汀光学异构体含量[5]，也采用了柱前衍生法，操作相对复杂。综上，本实验光学异构体的研究方法简便易行，设备普及率高，易于实现。
&&&&&&& 本研究含量测定的方法简便、准确、专属，可用于左卡尼汀口服溶液的含量和稳定性分析，为左卡尼汀口服溶液的质量控制提供依据。
参 考 文 献
[1]Janos Kerner, Charles Hoppel. Genetic disorders of carnitine metabolism and their nutritional management[J]. Annu Rev Nutr. -206.
[2]高立军，王涛，全东琴. 高效液相色谱法测定左卡尼汀注射液的含量. 科学技术与工程, ):191-194.
[3]Vogtc C, Kiessig S. Separation of D/L-carnitine enantiomers by capillary electrophoresis[J]. Journal of Chromatography A.-60.
[4]李庆宜，王学成，张超等.柱前衍生化HPLC法测定左卡尼汀中光学异构体的研究.中国药品标准,):381-384.
[5]徐娟娟，李杰梅，梁淑明等. 现代食品科技. ): 311-313.
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全张含6部电影的经典画面:
战舰波将金号
偷自行车的人
卡萨布兰卡
舞台生涯 卓别林
一个孤独男孩的记事
《战舰波将金号》 谢尔盖·爱森斯坦
&&《战舰波将金号》是苏联蒙太奇学派的顶峰之作。提起《战舰波将金号》，长长的敖德萨阶梯，滑落阶梯的婴儿车，张着血盆大口的军炮……这些画面，即使没有看过影片的人也不会感到陌生，而看过影片的人则会不假思索地想起那些充满节奏和激情的蒙太奇经典段落，稍加思索就知道，有五部电影曾经运用过这些经典场景。《战舰波将金号》的诞生使其他电影都黯然失色。《卡里加里博士的密室》、《最卑鄙的人》等影片的著名编剧卡尔·梅育，在看过这部电影后，曾经发誓不再编写虚构的题材，要转向纪录片电影。虽然这只是一个杜撰的轶事，但也说明了这部电影的影响力。&
&&&&“看过爱森斯坦的电影后，我们所有的人都感到很震惊，很兴奋。”洛特·艾斯讷在她的回忆录里写道：“1919年11月革命后建立起来的社会民主制，给人们带来了希望的自由，但是没过几年人们就心灰意冷了，因为所谓的民主制与旧的反动制度是一丘之貉。就在人们绝望的时候，《战舰波将金号》诞生了，是它重新点燃了人们追求民主和自由的火焰。”《战舰波将金号》再现了1905年黑海水兵起义的历史事件，但是它不仅仅是一部政治教材，而且是一部真正的电影。鲜活的人物，冉冉升起的太阳，茫茫的大雾，特别是那强劲的节奏感振奋人心。还有它充满音乐激情的蒙太奇结构，从急速到缓慢，从喧闹到静谧，在对比的过程中实现质的飞跃。如第二部分，先是起义的水兵沉默地等待，然后是起义的风暴。这种对立统一构成了全片为人所称道的“有机性”，在今天看来仍然是激动人心的。&
&&&&●惊心动魄的“敖德萨阶梯”大屠杀场面，是本片的高潮，也是蒙太奇的经典片段。
&&●影片的节奏感撼人心弦，爱森斯坦的剪辑手法直到今天仍为人们所模仿。&
本片的摄影师是爱德华·基赛，《战舰波将金号》能获得这样大的成功，他功不可没。在第三部“死者激发人们”中，战舰停靠在敖德萨港，听说水兵瓦库林楚克“为了一盆汤而死”，市民们闻讯赶来，人流以“L”、“S”、“C”、“十”字和“人”字形等曲线蜿蜒前进。这成为后人模仿的取景技术——即拍摄运动场面时，在一个画面内尽可能地出现曲线运动，使画面层次更丰富。在本片中，人流的曲线运动不仅是丰富多彩的，而且是立体的。仰拍人流从“C”形桥上走下，与下面进行纵深运动的人流汇和，形成复杂优美的曲线运动效果。基赛多变的风格，运用灯光的高超能力，对比例的成功把握，使他成为爱森斯坦的“御用”摄影师。
&&&&《战舰波将金号》是经典的五幕悲剧结构，分别为：1.人和蛆虫；2.舰上的戏剧；3.死者激发人们；4.敖德萨阶梯；5.同舰队相遇。影片按时间顺序展开多方面的叙述，内在的结构将叙述的多条辅线连在一起，多而不散，再经过结合剪辑使观众产生感情上的共鸣。宣传者(女，本片的主要正面角色无一例外全是女性)的演讲不断激起人们热烈的掌声，并随着沙皇政府派兵镇压而达到高潮；为了对抗镇压，波将金号向总参谋部开炮；最后的场景是墓园里的小天使像倒塌了，三只俯伏的石狮子一跃而起，昂首怒吼，这种隐喻手法为观众激动的情绪提供了宣泄点。至此，观众完全实现了从关注人物命运到与影片主题认同的这一转化，这是蒙太奇的胜利。
&&&&在表现大场面时，爱森斯坦注意与细节紧密结合，因为作为细节的人物与事物富于生命力，能够引起观众的关注和同情，这样，大场面的表现就不至于面目模糊。聪明的舰队医生，是他对生了蛆虫的腐肉作出鉴定，当他觉察到水兵们的愤怒时，小个子的他就跳到一位高个子军官后面，幸运地躲过一死；狡猾的鲍勃，为了不被牵扯到水兵们的起义中去而宁愿装死；在“敖德萨阶梯”血案中，一手拄地疲于逃命的无腿残疾人，抱着孩子请求军警停止杀戮的惊恐而绝望的母亲，中弹倒地的男青年，中弹而死的推婴儿车的年轻母亲，眼睛流血的中年妇女……看过这部影片的人，一辈子也不会忘记这些镜头。1926年，《战舰波将金号》在德国首映时，音乐由爱德蒙·梅瑟创作。精彩的画面和跌宕起伏的音乐，使《战舰波将金号》成为电影史上最激动人心的电影之一。
&&&&最后，波将金号逃走了，因为集结到敖德萨的沙皇舰队的战舰拒绝向起义者开炮。这是符合历史事实的。1905年，波将金号确实成功逃脱，来到罗马尼亚，舰上的全体士兵都获得了避难权，而返回俄国的人，或被关押或被杀害。后来，沙皇海军将战舰波将金号更名为“Panteleimon”,但新的名字并不能抹杀这段传奇般的历史。1919年，战舰波将金号被沉入海底。
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&卡萨布兰卡
第二次世界大战时，欧洲置于德国和意大利法西斯的铁蹄之下，人们要从欧洲逃往美国，都必须绕道摩洛哥北部城市卡萨布兰卡。1940年，北非法属摩洛哥的卡萨布兰卡，是纳粹控制下欧洲大陆的最后一扇门。想摆脱纳粹血腥统治而到别处寻求自由的人们，都纷纷涌进这个城市，它成了各国形形色色的人的云集之地。这些人不外是流亡者、投机家、间谍、罪犯、反纳粹分子与盖世太保。
　　两个德国秘密信使被杀死在沙漠中，他们的特别通行证也下落不明，全城到处大搜捕，恐怖的阴影笼罩着卡萨布兰卡。在当地一条不十分显眼的街上有家"里克酒店"，是人人喜欢去的社交场所。老板叫里克.勃兰，美国人，曾参加反法西斯战争，为了逃避纳粹迫害，从巴黎来到卡萨布兰卡，开了这家夜总会。某天晚上，从德国集中营逃了出来的抗击纳粹的进步运动领袖、捷克爱国志士维克多.拉罗斯偕同妻子伊尔莎光临酒店。他俩刚刚甩掉了盖世太保，来酒店避避风头，伺机前往美国，但德国当局早已通知卡萨布兰卡警局，布下天罗地网，准备在"里克夜总会"里缉拿他俩。警察局长雷诺特和纳粹少校特拉瑟来到夜总会，立刻命令里克不许帮助拉兹洛逃离卡萨布兰卡，并逮捕了拉兹洛的接线人尤迦蒂。
<img ALT="" HSPACE="0" src="/blog7style/images/common/sg_trans.gif" real_src ="http://www./yiwen//xinsrc_caac2f3038_22.jpg" ALIGN="left" BORDER="0"
TITLE="阿根廷&经典电影邮票全张&卡萨布兰卡" />　　拉兹洛和伊尔莎来到夜总会，得知接线人尤迦蒂被捕，内心异常不安。当伊尔莎看见一个黑人钢琴家正在演奏，她不禁倒吸了一口冷气。原来那黑人正是早先在巴黎的酒吧间弹琴的琴手，伊尔莎恳求山姆弹奏一首《时光流逝》的抒情曲。原来里克与伊尔莎在巴黎有过一段爱情。当时巴黎即将沦陷，里克和伊尔莎却沉浸在幸福的热恋之中。但这时因为里克是德军悬赏捉拿的人，必须离开巴黎。恰巧伊尔莎原以为阵亡的前夫拉罗斯侥幸未死，她只得跟里克匆匆诀别，他们相约一起逃离巴黎，然而伊尔莎却未能如约。里克为此十分伤心，后来变得郁郁寡欢，玩世不恭起来。里克被山姆再一次弹起的《时光流逝》，勾勒起了他对美好时光的回忆，里克听到歌曲和看到伊尔莎往事开始一幕幕重现脑海……
　　而这时的伊尔莎和拉兹洛正在设法让里克帮忙，用高价从黑市商人手里购买出境护照。
　　拉兹洛和伊尔莎在卡萨布兰卡已受到纳粹分子的跟踪，处境非常困难。一天深夜，伊尔莎走进里克住处，当里克回来后，就恳求他帮助他们出境，让拉兹洛去完成任务。里克想起往事，仍不肯拿出通行证。伊尔莎无奈掏出手枪，逼着里克交出通行证。当里克表示只有打死他，才能得到能行证时，伊尔莎才抑制不住内心的委屈，奔泻而出，她一边倾诉当年拉兹洛的出走、被捕、进集中营和传说他死讯的情景，一边沉醉在里克的怀抱中，以填补对里克的愧疚之情。里克谅解了伊尔莎，并决定帮助伊尔莎和她的丈夫出境。
　　第二天，拉兹洛夫妇从里克手里拿到了通行证，这时，里克逼迫警察局长雷诺特在通行证上填上拉兹洛夫妇的名字，并强行他给飞机场通话，放两人通行。拉兹洛夫妇离去后，德军斯特拉瑟少校突然破门而入，里克和他生死搏斗，少校冲向电话旁，企图阻止拉兹洛夫妇上飞机。一声枪响，少校慢慢趴到在地。
　　里克盯着飞机起飞，……飞机上的灯光渐渐远去。
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&偷自行车的人
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&<img ALT="user posted image" src="/blog7style/images/common/sg_trans.gif" real_src ="/images/P/.01.LZZZZZZZ.jpg" BORDER="0"
TITLE="阿根廷&经典电影邮票全张&卡萨布兰卡" />
偷自行车的人 Ladri di biciclette
导演 维托里奥&德&西卡 Vittorio De Sica
主演 朗培尔拖&马奇奥拉尼 Lamberto Maggiorani 安左&利阿纳拉 Enzo Staiola
获奖情况： 奥斯卡奖
剧情简介：
第二次世界大战后的罗马.失业工人安东在职业介绍所门口等了两年,终于被叫到了名字,他被介绍到一家广告公司去贴广告,并被告知,需自备自行车.安东的自行车已进了当铺,他只好假装有自行车.回家告诉妻子玛丽亚,玛丽亚把床上的床单和衣服等送进当铺赎回自行车.第二天喜气洋洋去上班.由于工作不熟练,贴海报时动作太慢,注意力太集中,身後的自行车被偷.当他转身时小偷已把自行车骑走了,他报告警察局也没用.第二天安东带上8岁的儿子和三个伙伴去市场上寻找失窃的车,在经常销赃的市场边果然看到偷车贼在与一名乞丐讲话,赶上叫喊抓贼,贼见势骑车就逃,追了一阵追不上,安东和儿子布鲁诺夫又去找这名乞丐,乞丐帮他去抓偷车人,乞丐死活不肯,两人的争论影响了教堂布道的气氛,被教民们赶出来,乞丐乘机逃掉,在追赶乞丐时布鲁诺夫饿了,他对父亲说:还是在教堂领了食物吧.安东神经再也支持不住了,打了儿子一记耳光,布鲁诺夫十分委屈地哭了.&
当安东在桥边又找到乞丐时,只听见有人喊:孩子掉河里了,安东以为是儿子投河了,急忙赶去,原来不是布鲁诺夫,乞丐又跑了,安东回到儿子身边为了继续找车子,又到一居民点.结果发现了偷车人和车子.正要和偷车人评理要车时,偷车人假装昏倒在地,周围居民反诬告安东是偷车贼,要扭送警察局,原来他们都是同伙.父子俩无奈又走了.万不得已安东也偷了街上的自行车,被车主抓住,挨了打,还要送警察局,在布鲁诺夫的哭求下,车主才松了手.大街上车水马龙,在茫茫人海中父子俩拉着手流着泪对视着,镜头越拉越远.&
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出身贫穷的卡维罗曾经是个伟大的喜剧演员，但现在已沦落为一个酒鬼。一天，他喝得醉醺醺地回到寄身的公寓，发现住在隔壁的女孩塞瑞拉·安布罗斯躺在床上，打开煤气企图自杀。塞瑞拉·安布罗斯是个芭蕾舞演员，因患了风湿不能再跳舞了，故产生了轻生的念头。卡维罗尽心地照顾她，用自己的喜剧天赋打消安布罗斯自杀的念头。后来医生的诊断证明，安布罗斯的小腿麻痹仅仅是心理作用。6个月以后，安布罗斯成功地再次站了起来，并且在一出芭蕾剧中担任主要角色，同一名作曲家陷入了热恋。两个年轻人决定结婚。卡维罗所能做的只能是默默地祝福安布罗斯，并且独自承受来自心灵的痛苦。
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四百击 The 400 Blows
电影导演：弗朗科依斯 特吕弗 (Francois Truffaut)
地区：法国
语言：法语
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<img ID="post_img" ALT="user posted image" src="/blog7style/images/common/sg_trans.gif" real_src ="/images/P/.01.LZZZZZZZ.jpg" BORDER="0" NAME="post_img"
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第十二届戛纳国际电影节 导演奖
英国学院奖最佳电影提名
纽约影评人协会奖
法国新浪潮著名导演Francois
Truffaut59年拍摄，这部作品给他带来了国际声誉。这是一部反映青少年问题的影片，主人公——小男孩Antoine
Doinel因无法忍受学校、家庭、社会的重压而走上叛逆的道路，寻找自己的自由。
“四百击”译自英文“The Four Hundred Blows”，而后者又译自法文LES QUATRE CENTS
COUPS，该俚语的意思是“青春期的强烈叛逆”。也许译作“无因的反叛”更好。
　　关于本片的主题和意义以及给人带来的感撼不在笔记范围，但我永远忘不了——Antoine被自己的父亲送进警察局，和罪犯与妓女一起被压上警车时，黑夜中他脸庞上闪闪的泪水。
　　提到这部片子，一般人都能想到最后有关奔跑的经典长镜头，这已被列入教科书中，其实本片还有很多精彩的段落。
　　导演选取了学校、家、警察局、少管所等地点做为对少年Doinel的施压场所，在这些地方Doinel永远处于被动的角色，镜头很少给人物全景。只有在街道或广场等室内的地方，镜头才放得开些，而且表达的内容也相对乐观。如片头低角度仰拍的巴黎街景，或体育老师带领众学生慢跑，跑到后来学生全都溜走的那个俯拍远景镜头，还在配乐上加了轻松的元素，在内容上也洗掉了一些压抑感。
　　但这并不说明在室外或街上Doinel就都很快乐，从一场在饥寒交迫的深夜偷牛奶的戏就可以看出。Doinel先起从印刷厂的“临时床”上起身，向镜头纵深走出，到街上后，向镜头右边走，通过跳轴又转到左边边，然后在偷牛奶的时候，更是左右反复走了好几次，最后走左边出镜，然后是从画面纵深处走到前景，摄像机摇到一个黑与白交界的街角落，被黑色淹没的Doinel大口喝着白色的牛奶，对比分明。这段戏充满了阴暗、落寞的气息，哪怕在后面Doinel跑入人流滚滚的大街里都挡不住那种孤独的意味。
　　本片特写镜头比较少，有种说法是特写镜头过于强调个体本身，就割裂了与环境的关系，相对于整部影片而言这个镜头就会失去存在的意义，而这也反映出导演对与环境与纪实的表达方式和自己独特的理解。
　　在影片中Doinel有很多跑的镜头，但都跑不远，镜头时长也很短。而压抑的氛围一直在持续，直到最后进入少管所达到一个高潮，Doinel在与心理医生的对话，通过叠画跳接来积累情绪上的不流畅，而Doinel的母亲探访更是通过对话把这种压抑发展到新的高峰。于是，在影片的最后，出于节奏的考虑，导演采取了长镜头的手法，让主人公和影片积累的情绪来一次彻底宣泄。
　　采取长镜头之前的一个镜头是Doinel躲在桥下面，看到没人追过来，于是向画面深处跑几步，然后向左拐。第一个长镜头长约一分二十秒，Doinel从左面出画，跳轴，强调情绪的变化。中全景，然后一直跑，跑出少管所的范围，声音是同期跑步声，甚至都能感受到他的心跳。第二个镜头，Doinel全景从画面远处向镜头右边跑来，出画，这时背景配乐起，镜头开始向左摇，能听到海浪声。当摇到海上的景色时，音乐声很大，用力的煽了一会儿情，照常理这时候电影就可以结束了，但摄像机还在向左摇，一直摇到岸边，出现Doinel的背影，刚才跑向镜头方向的Doinel现在是从镜头近处向纵深跑去，这个运动方向的转变十分自然，而且美妙，这个镜头一共大概50秒钟。影片的最后一个一多分钟的长镜头，表现的还是跑，全景，Doinel从岸上下来，跑到海滩上，继续向画面右方跑，镜头开始慢慢向右后方移动，摇。Doinel跑向大海，在海水中横着向右走了几步，却回过头向镜头走来，画面定格并推向了他那双迷茫、忧郁的双眼，特写，音乐和海浪声仍在继续，剧终。
　　这三个一组的长镜头，从视听角度看拍得真是炉火纯青，影片的配乐也十分到位。像这样的影片，无论在哪年诞生，最佳导演奖都会有Truffaut的位置。
　　Doinel能看到大海，却看不到自由。也许，争取自由的代价，就是失去自由。
至于末尾那段经典得要命的长跑，则是所有关于反叛和逃离的隐喻里最明显的一个。当然最最精彩的，还是Antoine面对大海的浪潮来袭时那著名的眼神。
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