菌糠多糖的提取工艺及应用--《辽宁科技大学》2013年硕士论文
菌糠多糖的提取工艺及应用
【摘要】：本文主要采用响应面法研究了热水浸提法提取菌糠多糖的最优条件，并尝试将微波辅助提取法和超声波辅助提取法应用与热水浸提法中，并且比较了两种改进方法的效果。其中热水浸提法最优条件优化是通过响应面法完成的，微波辅助提取法与超声波辅助提取法的优化结果是由单因素变量法完成的，粗多糖浸提液中的多糖浓度检测采用了苯酚—硫酸法。最后对提取液是否具有促进植物幼苗生长进行了试验，采用了黄瓜、番茄、辣椒三种作物的幼苗进行了生长实验。具体的内容和研究结果如下：
1.热水浸提法的最优提取条件优化采用的响应面优化法的思想。首先进行了单因素实验，然后在它的基础上进行了三水平三因素的实验设计，选取的三个因素为温度，提取时间和水料比。经过相应面软件Design-Expert的分析，得到的最优提取条件为：温度95℃，提取时间4.14h，水料比14.96:1，多糖提取率为19.85%。。考虑到实际应用中的简便性，将条件修正为95℃，4h，15:1。在此条件下得到的菌糠多糖含量为1.35mg/ml。
2.采用微波辅助加热的方式对传统的热水浸提法做了改进。在原有最佳条件的基础上，进行单因素变量实验，唯一变量为微波照射时间。得到的结果是：微波照射50min时能够显著提高菌糠多糖的提取效率。改进后的多糖提取率为2.43%。考察超声波对菌糠多糖提取效率的影响也采用了单因素变量法，唯一的变量为超声波功率。得到的结果是：在原有最佳条件的基础上，采用250w的超声波功率，在此条件下菌糠多糖的提取率为2.16%。微波辅助提取法和超声波辅助提取法与传统提取方法相比均有提高。对比两种改进方法的提取率和生产成本，微波辅助提取在效果上要优于超声波辅助提取。在大规模工业生产过程中微波辅助提取法更有优势。
3.通过对三种作物幼苗（黄瓜、番茄、辣椒）施用菌糠多糖提取液，并对其生长指标进行观察，得到结论：施用菌糠多糖提取液的幼苗与对照组相比，根系更加发达，植株更高，茎部更粗，壮苗指数更高。这说明，菌糠多糖对黄瓜幼苗，番茄幼苗，辣椒幼苗的生长具有促进作用。
【关键词】：
【学位授予单位】：辽宁科技大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2013【分类号】：TQ461【目录】：
中文摘要5-6ABSTRACT6-111. 绪论11-21 1.1 微波辅助提取的基本情况12-15
1.1.1 微波加热的基本原理12-13
1.1.2 微波加热的特点13-14
1.1.3 微波在天然产物提取方面的应用14-15 1.2 超声波辅助提取15-16
1.2.1 超声波提取的基本原理15
1.2.2 超声波提取的特点15-16
1.2.3 超声波辅助提取的应用16 1.3 活性多糖简介16-19
1.3.1 活性多糖的来源及性质17
1.3.2 活性多糖的命名和分类17
1.3.3 活性多糖的提取方法17-18
1.3.4 多糖的分析检测18-19 1.4 响应面分析法的基本介绍19 1.5 活性多糖的应用研究19-20 1.6 本文主要研究的内容及方法20-212. 热水浸提法提取菌糠多糖21-31 2.1 仪器、材料与试剂21 2.2 实验过程21-24
2.2.1 标准曲线的绘制21-22
2.2.2 提取工艺22
2.2.3 粗多糖浓度的检测方法22-23
2.2.4 单因素试验23-24 2.3 结果分析24-31
2.3.1 单因素实验结果分析24-25
2.3.2 响应面分析25-31
2.3.3 结果检验31 2.4 结论313. 热水浸提法的提取工艺改进31-36 3.1 微波辅助提取菌糠多糖31-34
3.1.1 仪器、材料与试剂31
3.1.2 试验方法31-32
3.1.3 实验结果及分析32-33
3.1.4 结论33-34 3.2 超声波辅助提取菌糠多糖34-36
3.2.1 仪器、材料与试剂34
3.2.2 实验方法34
3.2.3 实验结果及分析34-36
3.2.4 结论36 3.3 三种多糖提取方法的比较364.菌糠多糖的应用研究36-44 4.1 多糖提取液的预处理37
4.1.1 仪器和试剂37
4.1.2 处理方法37
4.1.3 浓度控制37 4.2 菌糠多糖提取液对黄瓜幼苗生长的影响37-39
4.2.1 实验材料37
4.2.2 实验方法37-38
4.2.3 结果与讨论38-39 4.3 菌糠多糖提取液对番茄幼苗生长的影响39-41
4.3.1 实验材料39-40
4.3.2 实验方法40
4.3.3 结果与讨论40-41 4.4 菌糠提取粗多糖对辣椒幼苗生长的影响41-43
4.4.1 实验材料41-42
4.4.2 实验方法42
4.4.3 结果与讨论42-43 4.5 作用机理分析与推测43-44 4.6 小结445. 结论44-47 5.1 热水浸提法提取菌糠多糖的最佳条件45 5.2 热水浸提法提取多糖的改进45 5.3 菌糠多糖对植物幼苗的影响45-47参考文献47-50攻读硕士学位期间发表学术论文情况50-51致谢51-52作者简介52-53
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京公网安备74号桦褐孔菌深层培养及其多糖提取工艺和抗肿瘤活性研究--《福建农林大学》2009年硕士论文
桦褐孔菌深层培养及其多糖提取工艺和抗肿瘤活性研究
【摘要】：
桦褐孔菌(Inonotus obliquus或Fuscoporia obliqua)属于多孔菌科褐卧孔菌属,是一种十分珍稀且名贵的药用真菌,在俄罗斯又被称为Chaga。桦褐孔菌对各种癌症、心脏病、糖尿病、艾滋病等均有很好的疗效。
常生于白桦、银桦、榆树和赤杨等活立木的树皮下的野生桦褐孔菌资源日益枯竭,人工培养研究迫在眉睫。本文研究了桦褐孔菌液体发酵适合的碳源、氮源、碳氮比及其所需的微量元素和维生素。结果如下:菌丝生长的最适无机氮源为磷酸氢二铵;最适有机氮源为黄豆粉;最适碳源为葡萄糖;最适碳氮比为20:1;Mn元素有促进生长的作用;最适合的维生素为VB1。以菌丝体干重为指标,通过L9(34)正交试验,筛选出桦褐孔菌菌丝体液体培养的最佳培养基配方是:葡萄糖20 g/L、黄豆粉30 g/L、KH2PO4 3 g/L、MgSO4·7H2O 0.7 g/L、VB1 0.005 g/L,在26℃下培养15 d菌丝产量达到0.794 g/100 mL。
采用苯酚-硫酸法测定多糖含量以总多糖含量为指标,通过L9(33)正交试验,对热水浸提法的桦褐孔菌菌丝体多糖提取工艺进行了优化。桦褐孔菌多糖热水浸提法的最佳工艺为:料水比为1:10,浸提温度为100℃,提取时间为3 h。此工艺下桦褐孔菌总多糖含量达到4.04 %。
通过构建小鼠S180荷瘤模型对桦褐孔菌多糖进行抗肿瘤作用的研究。桦褐孔菌胞内多糖对S180的抑制率为30.13 % ~ 41.07 %,与剂量呈正相关关系。桦褐孔菌胞外多糖的抑瘤率为23.29 % ~ 36.73 %,也与剂量呈正相关关系。环磷酰胺为52.83 %。三者各组分均能极显著抑制肿瘤生长。在桦褐孔菌胞内多糖和胞外多糖2个试验组中,胞内多糖的抑瘤效果较好。
与对照组相比,桦褐孔菌胞内外多糖均可显著或极显著地提高S180荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数(免疫指标)。桦褐孔菌胞内多糖的胸腺指数为3.36±0.17 ~ 3.84±0.51,脾指数为7.64±0.63 ~ 7.97±1.02,均与剂量呈正相关关系。桦褐孔菌胞外多糖的胸腺指数为2.7±0.30 ~ 3.21±0.29,脾指数为7.43±0.61 ~ 7.57±0.53。环磷酰胺胸腺指数为2.04±0.34,与对照没有显著差异;脾指数为4.35±0.62,与对照比极显著降低小鼠脾指数。结果表明桦褐孔菌多糖同时具有提高荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的作用。
【关键词】：
【学位授予单位】：福建农林大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2009【分类号】：R285;R284【目录】：
Abstract8-10
1 文献综述10-24
1.1 桦褐孔菌的研究概况10-22
1.1.1 桦褐孔菌简介10-12
1.1.2 桦褐孔菌的分类地位和人工培养特性12-15
1.1.2.1 桦褐孔菌的学名及分类地位12
1.1.2.2 桦褐孔菌的形态12-13
1.1.2.3 桦褐孔菌液体发酵培养条件的研究13-14
1.1.2.4 桦褐孔菌人工驯化栽培技术研究14-15
1.1.3 桦褐孔菌多糖15-16
1.1.3.1 桦褐孔菌多糖概述15
1.1.3.2 多糖的提取方法15
1.1.3.3 多糖的分离和纯化15-16
1.1.3.4 多糖的测定方法16
1.1.4 桦褐孔菌的化学成分及药理和药用价值16-22
1.1.4.1 桦褐孔菌的化学成分16-18
1.1.4.2 桦褐孔菌的药理和药用价值18-22
1.2 本研究的目的和意义22-24
2 桦褐孔菌发酵培养基配方的研究24-39
2.1 材料与方法24-27
2.1.1 供试菌株24
2.1.2 培养基配方24-25
2.1.3 试验方法25-27
2.2 结果与分析27-38
2.2.1 不同氮源对桦褐孔菌菌丝生长的影响27-29
2.2.2 不同碳源对桦褐孔菌菌丝生长的影响29-31
2.2.3 不同碳氮比对桦褐孔菌菌丝生长的影响31-33
2.2.4 不同微量元素对桦褐孔菌菌丝生长的影响33-35
2.2.5 不同维生素对桦褐孔菌菌丝生长的影响35-36
2.2.6 正交试验36-38
2.3 结论38-39
3 桦褐孔菌多糖提取条件的优化39-45
3.1 材料与方法39-41
3.1.1 试验材料39
3.1.2 试验方法39-41
3.1.2.1 热水浸提法提取工艺39-40
3.1.2.2 热水浸提法正交试验设计40
3.1.2.3 多糖得率计算40
3.1.2.4 多糖含量测定——苯酚-硫酸法40-41
3.2 结果与分析41-43
3.3 结论与讨论43-45
3.3.1 结论43
3.3.2 讨论43-45
4 桦褐孔菌多糖的抗肿瘤活性研究45-52
4.1 材料与方法45-47
4.1.1 试验材料45
4.1.1.1 供试样品45
4.1.1.2 受试动物45
4.1.1.3 仪器和试剂45
4.1.2 试验方法45-47
4.1.2.1 小鼠 S_(180) 荷瘤模型的建立45-46
4.1.2.2 试验动物分组与多糖剂量设定46-47
4.1.2.3 抑瘤率计算方法47
4.1.2.4 对 S_(180) 荷瘤小鼠免疫器官的影响47
4.1.2.5 试验数据处理47
4.2 结果与分析47-50
4.2.1 桦褐孔菌多糖的抗肿瘤活性47-49
4.2.2 桦褐孔菌多糖对 S_(180) 荷瘤小鼠免疫器官的影响49-50
4.3 讨论50-52
参考文献52-59
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你可能喜欢羊肚菌液体深层发酵条件及多糖提取工艺的研究--《安徽农业大学》2007年硕士论文
羊肚菌液体深层发酵条件及多糖提取工艺的研究
【摘要】：
羊肚菌是一种珍贵的食药两用真菌,营养丰富,且羊肚菌多糖具有增强肌体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰老等诸多功效。目前,就有关羊肚菌液体深层发酵方面,仅研究了发酵条件对菌丝体生物量的影响,而未考虑对发酵液中胞外多糖产量的影响,在菌丝体多糖和胞外多糖提取过程中,各关键因素对多糖提取效率的影响也没有进行研究。
本研究以羊肚菌(Morchella esculenta)为材料,采用液体深层发酵技术,研究不同培养基和发酵条件对菌丝体生物量和胞外多糖产量的共同影响,并对羊肚菌的液体深层发酵工艺进行优化。研究了在菌丝体多糖和胞外多糖提取过程中,各关键因素对提取效率的影响,并对多糖提取工艺进行优化,以期为羊肚菌发酵产品,特别是发酵多糖的进一步研究提供理论基础和科学依据。主要研究结果有:
1.以发酵获取的菌丝体生物量和胞外多糖产量为指标,通过一次单因素筛选试验和两次正交试验,对碳源、氮源及无机盐进行筛选,最终确定了羊肚菌液体深层发酵的最优培养基配比为:玉米粉4.0%、葡萄糖1.0%、黄豆粉2.0%、酵母粉0.3%、KH_2PO_4 0.2%、MgSO_4 0.1%、CaSO_4 0.1%。
2.在确定最优发酵培养基的基础上,进行不同温度、起始pH、装液量、接种量、摇床转速的单因素试验,通过液体摇瓶培养,研究了各因素对菌丝体生物量和胞外多糖的影响。确定了羊肚菌摇瓶培养的最优条件为:24℃、起始pH 5.8、摇瓶装液量100ml/250ml、接种量10.0ml、摇床转速140r/min。
3.羊肚菌发酵液中菌丝体生物量与胞外多糖产量呈正相关,与氨基氮含量呈一定负相关,与还原糖含量及发酵液pH有一定的相关性。发酵第108h,菌丝体生物量最大,胞外多糖产量接近最大值,还原糖含量和蛋白质含量接近最低值,可以确定菌丝体生长、增殖已达到最佳状态,确定108h左右为发酵的终点时间。
4.在羊肚菌发酵菌丝体多糖提取过程中,对浸提比、浸提时间、浸提温度和醇析浓度这四个因素进行正交设计,确定了发酵菌丝体多糖的最佳提取工艺为:浸提温度为80℃,提取时间150min,浸提比1∶40,醇析浓度为75%,即加3倍水体积的95%乙醇沉淀后,沉淀物经无水乙醇反复洗涤后,真空冷冻干燥,得菌丝体粗多糖。在羊肚菌发酵胞外多糖提取过程中,对浓缩倍数、浓缩温度、醇析浓度和提取液pH值这四个因素进行正交设计,确定了胞外多糖的最佳提取工艺为:首先将离心去除菌丝体的滤液的pH调至6.0,80℃浓缩至原体积的1/3,冷却后加入预冷的95%乙醇使其终浓度为75%,放置4℃冰箱至少24h,4500r/m离心收集沉淀。沉淀经无水乙醇反复洗涤后,真空冷冻干燥,得胞外粗多糖。
【关键词】：
【学位授予单位】：安徽农业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2007【分类号】：S646【目录】：
Abstract4-8
1 文献综述8-17
2 引言17-19
3 材料与方法19-23
3.1 材料19-20
3.1.1 供试菌株19
3.1.2 培养基19
3.1.3 仪器和试剂19-20
3.2 方法20-23
3.2.1 菌种的活化及摇瓶培养20
3.2.2 羊肚菌液体深层发酵工艺的优化20-22
3.2.3 羊肚菌多糖提取工艺的优化22-23
4 结果与分析23-35
4.1 羊肚菌液体深层发酵工艺的优化23-33
4.1.1 最佳碳源的确定23
4.1.2 最佳氮源的确定23-24
4.1.3 碳源、氮源最佳组合的确定24-25
4.1.4 无机盐最佳组合的确定25-27
4.1.5 最佳培养温度的确定27
4.1.6 最佳起始pH值的确定27-28
4.1.7 最佳装液量的确定28-29
4.1.8 最佳接种量的确定29
4.1.9 最佳摇床转速的确定29-30
4.1.10 羊肚菌摇瓶发酵过程中的动态变化30-33
4.2 羊肚菌多糖提取工艺的优化33-35
4.2.1 菌丝体多糖提取工艺的优化33-34
4.2.2 胞外多糖提取工艺的优化34-35
5 讨论35-40
5.1 培养基对羊肚菌液体发酵的影响35-36
5.1.1 碳源的影响35
5.1.2 氮源的影响35
5.1.3 无机盐的影响35-36
5.2 发酵条件羊肚菌液体发酵的影响36-38
5.2.1 温度的影响36
5.2.2 起始pH值的影响36-37
5.2.3 接种量、装液量和摇床转速的影响37
5.2.4 羊肚菌液体发酵终点时间的确定37-38
5.3 羊肚菌多糖提取工艺38-40
5.3.1 菌丝体多糖提取工艺的优化38
5.3.2 胞外多糖提取工艺的优化38-40
6 结论40-41
6.1 羊肚菌液体深层发酵最佳工艺40
6.2 羊肚菌多糖提取最佳工艺40-41
参考文献41-47
作者简介48
硕士研究生期间发表的论文48
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